幽門螺桿菌對人胃上皮細胞的損傷及抗氧化劑的防護作用.pdf

1、幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)是一種螺旋狀或S狀、微需氧的革蘭氏陰性細菌，專一性定居于人胃，構(gòu)成人類急、慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌和胃黏膜相關淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤的主要病因。Hpylori在人群中的感染率非常高，達40％-90％，通常在兒童期感染，而且一經(jīng)感染，若不根除治療，將終生攜帶，攜帶者是H.pylori的傳染源。H.pylori引起胃-十二指腸疾病發(fā)生的機制涉及細菌本身致病因子、細菌黏附與定植、宿主

2、炎癥/免疫反應、氧脅迫、細胞增殖和凋亡等，但是，研究結(jié)果不一致或存在矛盾，迄今，Hpylori的確切致病機制未有定論。H.pylori相關疾病的治療普遍采用根除細菌的抗菌療法，并配以酸抑制劑或鉍制劑。但由于細菌耐藥性的出現(xiàn)及日益嚴重，一小部分人治療失敗，抗菌療法受到挑戰(zhàn)。采用非抗生素療法已引起人們的關注并正在研究中。 本論文選取體外培養(yǎng)的人胃上皮細胞SGC-7901作為模型，從細胞增殖和氧脅迫的角度探討Hpylori的致病機制。

3、采用細胞計數(shù)法、XTT試驗和BrdU摻入試驗測定H.pylori對細胞存活和增殖的影響；分別用彗星電泳和DNA片段化ELISA測定DNA損傷；用o-鄰苯二醛熒光法測定GSH水平：用基于DCFH-DA熒光染料的流式細胞儀測定ROS的產(chǎn)生。同時研究抗氧化劑維生素C、亞硒酸納、葉酸、丁基羥基苘香醚、乙醇以及常見的兩種抗氧化酶過氧化氫酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)對H.pylori引起的細胞損傷的防護作用。 結(jié)果：(1)H.py

4、lori以感染劑量和時間依賴性地抑制了胃細胞的存活和增殖。同時，H.pylori以感染劑量和時間依賴性地降低胃細胞GSH水平，刺激胃細胞產(chǎn)生ROS，使胃細胞處于氧脅迫狀態(tài)。H.pylori還以感染劑量和時間依賴性地使胃細胞DNA鏈斷裂和片段化，損傷了DNA。H.pylori引起的細胞DNA損傷與ROS增多正相關，但與GSH減少和細胞增殖負相關。提示氧脅迫及其介導的DNA損傷可能是H.pylori致病的一種機制。 (2)抗氧化劑維

5、生素C、亞硒酸鈉和葉酸以及抗氧化酶CKT和SOD對H.pylori感染引起的GSH減少、ROS增多、DNA損傷均有顯著的防護作用。但是具有抗氧化作用的食物添加劑丁基羥基茴香醚對H.pylori相關損傷既無防護作用，也無毒性。作為抗氧化劑的乙醇對H.pylori引起的ROS增多和DNA損傷無防護作用，還降低了GSH水平?？寡趸瘎┑姆雷o作用從另一方面證明H.pylori的氧脅迫致病機制，并提示采用抗氧化劑治療H.pylori相關疾病是對癥的