中醫(yī)分期序貫治療對(duì)哮喘大鼠氣道重構(gòu)MMP-9及TIMP-1表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:利用免疫組化、Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)哮喘分期序貫治療對(duì)哮喘大鼠氣道重構(gòu)肺組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-9及其抑制劑-1表達(dá)影響的研究,為哮喘的防治提供新的思路。
　　方法:SD大鼠隨機(jī)分成7組,為哮喘模型組(X組),正常對(duì)照組(Z組),序貫治療1組(A1組),序貫治療2組(A2組),序貫治療3組(A3組),孟魯司特鈉組(M組),布地奈德組(B組),除Z組外,其余各組均以卵蛋白(OVA)輔以氫氧化鋁為佐劑

2、與第1、8、15天注射致敏,22天后隔天霧化吸入卵蛋白8周激發(fā)哮喘,建立哮喘模型。于實(shí)驗(yàn)第8天即第二次致敏的同一天開始,A2組隔天胃飼金水六君煎加減方20g/kg/d;A3組隔天胃飼六味地黃顆粒20g/kg/d;M組隔天胃飼白三烯受體拮抗劑(孟魯司特1mg/kg/d);B組大鼠隔天霧吸布地奈德(0.64ml/kg/d)并予等量生理鹽水胃飼,其余各組以生理鹽水胃飼代替。第22天開始激發(fā),A1組急性期麻杏二陳湯灌胃,緩解期期和穩(wěn)定期胃飼生理

3、鹽水;A2組急性期麻杏二陳湯灌胃,緩解期胃飼金水六君煎加減,穩(wěn)定期胃飼生理鹽水;A3組急性期麻杏二陳湯灌胃,緩解期胃飼金水六君煎加減方,穩(wěn)定期胃飼六味地黃顆粒;M組激發(fā)后霧吸沙丁胺醇,緩解期和穩(wěn)定期胃飼孟魯司特鈉;B組激發(fā)后霧吸沙丁胺醇,緩解期和穩(wěn)定期霧吸布地奈德,X組以生理鹽水胃飼代替,干預(yù)7周后分別運(yùn)用免疫組化、Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對(duì)SD大鼠進(jìn)行MMP-9、TIMP-1定位、定量表達(dá)的分析,擬從分子水平到

4、基因水平上探討哮喘大鼠肺組織MMP-9、TIMP-1表達(dá)影響的生物學(xué)機(jī)制。
　　結(jié)果:(1)大鼠行為學(xué)表現(xiàn)觀察發(fā)現(xiàn)哮喘模型組(X組)大鼠激發(fā)逐漸出現(xiàn)躁動(dòng)不安、打噴嚏、呼吸加快或俯臥少動(dòng)、飲水增多、毛發(fā)漸漸發(fā)黃,隨著激發(fā)次數(shù)的增多,出現(xiàn)精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、弓背、前肢縮抬、節(jié)律性收腹樣喘促,可聞哮鳴音,毛發(fā)漸漸枯槁發(fā)黃而無光澤,取出后遺留屎尿較多,甚至出現(xiàn)雙耳及口唇紫紺,更有甚者喘促至死。(2)免疫組化法、Western blot法和