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文檔簡介
1、目的: (1)觀察在不同糖濃度下大鼠腎小球系膜細(xì)胞中結(jié)締組織生長因子(CTFG)隨時(shí)間變化表達(dá)的差異。 (2)觀察不同濃度CTGF對(duì)正常糖環(huán)境下大鼠腎小球系膜細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)和TIMP-2 mRNA表達(dá)的影響。 (3)觀察不同濃度CTGF對(duì)正常糖環(huán)境下大鼠腎小球系膜細(xì)胞的Ⅳ-型膠原(Col-Ⅳ)濃度的影響。 (4)探討CTGF
2、對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶系的影響及其在糖尿病腎病發(fā)生機(jī)制中的作用。 方法: RT-PCR方法檢測(cè)大鼠腎小球系膜細(xì)胞CTGF在不同糖濃度和不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá),正常糖環(huán)境下大鼠腎小球系膜細(xì)胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2mRNA在不同濃度CTGF時(shí)的表達(dá)。ELISA法檢測(cè)正常糖環(huán)境下大鼠腎小球系膜細(xì)胞Col-Ⅳ在不同濃度CTGF時(shí)的表達(dá)。 結(jié)果: (1)在正常血糖濃度(5.6mmol/L)和11.0
3、mol/L血糖濃度下,CTFGmRNA的表達(dá)隨著時(shí)間的延長沒有明顯差異(P>0.05)。在25mmol/L,的糖濃度下CTGFmRNA的表達(dá)隨著時(shí)間的延長而顯著增加(P<0.05)。 (2)在不同濃度CTGF誘導(dǎo)下,TIMP-1mRNA的表達(dá)增加(P<0.05),且隨著CTGF濃度的增高而增高。而在不同濃度CTGF的誘導(dǎo)下,TIMP-2mRNA的表達(dá)無明顯改變(P<0.05)。在CTGF濃度增加的同時(shí),MMP-2mRNA和MMP
4、-9mRNA表達(dá)減少。 (3)不同濃度CTGF誘導(dǎo)腎小球系膜細(xì)胞后,Col-Ⅳ的濃度隨著CTGF濃度的增加而增加,2.5ng/mlCTGF可明顯增加Col-Ⅳ的濃度(P<0.05)。 結(jié)論: (1)血糖達(dá)到一定濃度(25mmol/L)時(shí)能夠促進(jìn)大鼠腎小球系膜細(xì)胞CTGF的表達(dá),且隨著作用時(shí)間的延長而增加。 (2)CTGF可呈劑量依賴性的下調(diào)腎小球系膜細(xì)胞MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的表達(dá),上
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