芡實對糖尿病腎病大鼠腎臟組織MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  探索芡實對DN大鼠腎臟中MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ表達的影響。
  方法:
  將65只健康雄性Wistar大鼠,隨機取10只選為正常組(N組);余55只大鼠利用一次性腹腔里注入鏈脲佐菌素(STZ35mg/kg)制造DN模型,模型制造成功后,隨機分成DN組、芡實低劑量組(EL1.5g·kg-1·d-1)、中劑量組(EM3.0g·kg-1·d-1)、高劑量組(EH6.0g·kg-1·d-1)

2、及氯沙坦鉀組(LP30mg·kg-1·d-1),各組11只,分別予以不同劑量的芡實以及氯沙坦鉀藥物,N組及DN組予以等體積的蒸餾水,使用灌胃途徑給藥。12周后,化驗大鼠血糖、24小時尿蛋白定量、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白之排泄率(UAER)、尿蛋白/肌酐(Up/Ucr);HE、Masson、PAS染色予以觀察各組大鼠的腎臟病理改變;免疫組織化學法測定各組大鼠腎組織MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ表達情況;運用

3、實時熒光定量PCR(Real-time PCR)技術檢測腎組織中MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ基因mRNA的表達。
  結(jié)果:
  1.生化指標結(jié)果:藥物處理12周末,與N組比較,DN組血糖、24h尿蛋白定量、Scr、BUN、UAER、Up/Ucr顯著升高( p<0.05);與DN組比較,EL組24h尿蛋白定量、Scr、BUN、UAER、Up/Ucr無明顯減低( p>0.05);EM組、EH組及LP組24h尿蛋

4、白定量、Scr、BUN、UAER、Up/Ucr明顯下降( p<0.05),但仍高于N組;EM組、EH組及LP組各組間相比較,無統(tǒng)計學差異( p>0.05)。與DN組相比,EL組、EM組、EH組及LP組血糖均未見顯著的變化。2.病理改變:與N組比較,DN組大鼠顯示腎小球的體積增大,系膜細胞增殖,細胞外基質(zhì)(ECM)增加,基底膜增寬,部分腎小管出現(xiàn)萎縮及間質(zhì)中纖維組織增加;與DN組比較,EL組減輕不顯著;EM組、EH組及LP組上述的病理變化

5、明顯減輕。3.免疫組化結(jié)果顯示:(1)在各組大鼠腎組織MMP-9表達:N組大鼠腎小球的系膜區(qū)以及腎小管均可見棕黃色顆粒物質(zhì),以腎小管為著。與N組比較,DN組大鼠中腎組織MMP-9表達顯著減少( p<0.05);與DN組比較,EL組MMP-9表達增加不明顯,無統(tǒng)計學差異( p>0.05);與DN組比較,EM組、EH組及LP組MMP-9表達顯著增加( p<0.05);EM組、EH組及LP組各組之間的比較,無統(tǒng)計學意義( p>0.05);(2

6、)在各組大鼠腎組織TIMP-1表達:N組大鼠在腎小管可見棕黃色顆粒,而腎小球的系膜區(qū)有散在棕黃色顆粒物質(zhì);與N組相比,DN組大鼠中腎組織TIMP-1表達明顯增加( p<0.05);與DN組比較,EL組TIMP-1表達減低不明顯,無統(tǒng)計學差異( p>0.05);與DN組比較,EM組、EH組及LP組TIMP-1的表達顯著減少( p<0.05);EM組、EH組及LP組各組之間的比較,無統(tǒng)計學意義( p>0.05);(3)在各組大鼠腎組織Col

7、lagenⅣ表達:N組大鼠的腎小球基底膜(GBM)以及腎小管的基底膜均有棕黃色顆粒物質(zhì);與N組比較,DN組腎臟中CollagenⅣ表達增加明顯( p<0.05);與DN組比較,EL組CollagenⅣ表達減少不明顯,無統(tǒng)計學差異( p>0.05);與DN組比較,EM組、EH組及LP組CollagenⅣ的表達顯著減少( p<0.05);EM組、EH組及LP組各組之間的比較,無統(tǒng)計學差異( p>0.05)。4. Real-time PCR結(jié)

8、果:與N組比較,DN組MMP-9 mRNA表達顯著下降( p<0.05),TIMP-1及CollagenⅣmRNA表達顯著增加( p<0.05),MMP-9與TIMP-1 mRNA比值顯著下調(diào)( p<0.05);與DN組比較,EL組MMP-9、TIMP-1以及CollagenⅣmRNA表達未見明顯變化,無統(tǒng)計學差異( p>0.05);與DN組比較,EM組、EH組及LP組MMP-9 mRNA表達顯著增加( p<0.05),TIMP-1及C

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