樹(shù)突狀細(xì)胞在鼻息肉免疫調(diào)控中的作用.pdf

1、目的:樹(shù)突狀細(xì)胞(Dendritic cells，DC)被稱為功能最強(qiáng)大的抗原遞呈細(xì)胞，是機(jī)體免疫應(yīng)答的始動(dòng)者，其表面可表達(dá)一些特殊的膜受體，能有效地識(shí)別和處理抗原，可遷移至T細(xì)胞區(qū)刺激初始型T細(xì)胞增殖活化，誘導(dǎo)T細(xì)胞成熟，產(chǎn)生免疫應(yīng)答。DC在攝取抗原或炎性信號(hào)刺激后分化成熟，其表面MHCⅡ類分子的表達(dá)顯著提高，并向CD4+T提供特異性信號(hào)誘導(dǎo)CD4+T向不同輔助性T細(xì)胞(T helper lymphocyte，Th)分化，通過(guò)調(diào)節(jié)Th

2、1/Th2細(xì)胞的平衡，維持機(jī)體正常的免疫功能。鼻息肉組織中異常的免疫狀態(tài)已被眾多學(xué)者認(rèn)可，并且存在著Th1/Th2細(xì)胞比例的失衡。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)鼻息肉患者經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療前、后鼻息肉組織及對(duì)照組鼻腔黏膜組織中DC標(biāo)記CD83、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-4（Interleukin-4，IL-4）以及嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophils，EOS)的表達(dá)水平，了解DC在鼻息肉組織中

3、的表達(dá)情況，并進(jìn)一步探討DC在鼻息肉組織免疫調(diào)控中的作用以及糖皮質(zhì)激素治療對(duì)鼻息肉組織中DC免疫調(diào)控的影響。
　　方法:選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的2013年6月至2013年12月瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科住院鼻息肉患者30例作為實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組患者均予以全身及鼻腔局部同時(shí)使用糖皮質(zhì)激素4-7d，于入院接受治療前及手術(shù)時(shí)分別采集標(biāo)本，即激素治療前和激素治療后各30例;選取同時(shí)期行鼻中隔偏曲矯正術(shù)住院患者的部分鼻甲黏膜18例作為對(duì)照組，

4、采用免疫組織化學(xué)（SABC法）及原位雜交技術(shù)檢測(cè)，對(duì)激素治療前、后鼻息肉組織及對(duì)照組鼻甲黏膜組織中CD83、TNF-α、IL-4的蛋白及mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，并采用HE染色對(duì)組織中EOS的陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，在顯微鏡下觀察激素治療前、后及對(duì)照組中CD83、TNF-α、IL-4、 EOS的表達(dá)情況并采集圖像，利用Image-Pro Plus圖像軟件分析得到CD83、TNF-α、IL-4陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度值，在顯微鏡下計(jì)數(shù)得到EOS細(xì)胞數(shù)

5、。采用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:1、CD83陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)情況:激素治療前免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.1618±0.0578、0.2048±0.0380;激素治療后免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.0359±0.0149、0.0505±0.0189;對(duì)照組免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別0.0075±0.0027、0.0059±0.0013。激素治療

6、前、后分別與對(duì)照組比較，P值均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;激素治療前和激素治療后比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;2、TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)情況:激素治療前免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.1520±0.0557、0.0668±0.0201;激素治療后免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.0576±0.0232、0.0388±0.0134;對(duì)照組免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.0

7、061±0.0022、0.0075±0.0032。激素治療前、后分別與對(duì)照組比較，P值均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;激素治療前和激素治療后比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;3、IL-4陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)情況:激素治療前免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.2314±0.0434、0.1419±0.0552;激素治療后免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.0228±0.0059、0.0293±0.0148;對(duì)照

8、組免疫組織化學(xué)和原位雜交染色平均光密度值結(jié)果分別為0.0031±0.0014、0.0056±0.0024。激素治療前、后分別與對(duì)照組比較，P值均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;激素治療前和激素治療后比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;4、EOS表達(dá)情況:激素治療前為45.24±14.80個(gè)，激素治療后為14.99±5.72個(gè)，對(duì)照組為4.08±1.49個(gè)。激素治療前、后分別與對(duì)照組比較，P值均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;激素治療前和激

9、素治療后比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;5、激素治療前經(jīng)免疫組織化學(xué)和原位雜交染色檢測(cè)發(fā)現(xiàn)IL-4在鼻息肉組織中的表達(dá)水平均高于TNF-α，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值分別為6.197，6.995，P值均＜0.05）;激素治療后經(jīng)免疫組織化學(xué)和原位雜交染色檢測(cè)發(fā)現(xiàn)IL-4在鼻息肉組織中的表達(dá)水平均低于TNF-α，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t值分別為7.996，2.623，P值均＜0.05）;6、CD83與TNF-α表達(dá)的相關(guān)性分析:激素治療前、

10、后CD83和TNF-α在鼻息肉組織中的表達(dá)水平均呈正相關(guān)，P＜0.05;7、CD83與IL-4表達(dá)的相關(guān)性分析:激素治療前、后CD83和IL-4在鼻息肉組織中的表達(dá)水平均呈正相關(guān)，P＜0.05;8、CD83與EOS表達(dá)的相關(guān)性分析:激素治療前、后CD83和EOS在鼻息肉組織中表達(dá)水平均呈正相關(guān)，P＜0.05。
　　結(jié)論:1、成熟DC表面標(biāo)志物CD83在鼻息肉組織中高表達(dá)，表明DC參與了鼻息肉的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程;2、TNF-α和IL-

11、4分別是Th1和Th2細(xì)胞代表因子之一，激素治療前其表達(dá)水平均明顯多于對(duì)照組，且IL-4的表達(dá)水平高于TNF-α，表明鼻息肉組織中Th1/Th2混合表達(dá)，DC誘導(dǎo)Th0向Th2細(xì)胞分化，使Th2細(xì)胞占優(yōu)勢(shì);3、激素治療干預(yù)后TNF-α和IL-4表達(dá)水平顯著低于激素治療前，高于對(duì)照組，且IL-4的表達(dá)水平低于TNF-α，提示經(jīng)激素治療干預(yù)后DC可能抑制Th2分化，誘導(dǎo)Th0向Th1細(xì)胞分化，使鼻息肉組織中Th1/Th2比例發(fā)生逆轉(zhuǎn);4、C