白樹(shù)花多糖的結(jié)構(gòu)及其抗凝血活性研究.pdf

1、白樹(shù)花[Polyporus albicans(Imaz.) Teng]主要分布于中國(guó)吉林省，屬于擔(dān)子菌綱多孔菌科多孔菌屬，是一種可食用和藥用的真菌。目前對(duì)白樹(shù)花多糖的研究報(bào)道較少，只有國(guó)內(nèi)對(duì)其結(jié)構(gòu)和免疫活性進(jìn)行了初步研究。但是白樹(shù)花多糖的精確結(jié)構(gòu)研究以及對(duì)多糖進(jìn)行硫酸化修飾后的抗凝血活性研究未見(jiàn)報(bào)道。因此本研究將白樹(shù)花真菌多糖進(jìn)一步分離純化，對(duì)其結(jié)構(gòu)、硫酸化修飾及修飾后多糖的抗凝血活性進(jìn)行研究，以期為白樹(shù)花多糖的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供理論基

2、礎(chǔ)。
　　白樹(shù)花粗多糖經(jīng)凍融、醇分級(jí)、蛋白酶法和Sevage法脫蛋白、HPLC分離后得到一個(gè)主要的純化組份—PATP I。經(jīng)HPLC分析表明:白樹(shù)花多糖PATP I由葡萄糖、甘露糖、半乳糖組成，其摩爾比為15.7∶4.2∶1，分子量為33 kDa。
　　采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化、GC-MS、IR、NMR等方法對(duì)PATP I進(jìn)行測(cè)定分析，確定其分子結(jié)構(gòu)為:主鏈由(1→2)-β-D-Man殘基、以及少量

3、的(1→3)α-Glc構(gòu)成，分支點(diǎn)為(1→2，6)-β-Glc殘基;支鏈豐富，平均每2個(gè)己糖殘基就會(huì)出現(xiàn)一個(gè)分支。推斷PATP I結(jié)構(gòu)的重復(fù)單元為:
　　Glc1→6
　　Glc(1→6)Gal1→6
　　→3)Glc(1→2)Glc(1→2)Man(1→2)Glc(1→2)Man(1→2)Glc(1→2)Man(1→2)Glc(1→2)Man(1→
　　6←1 Glc
　　6←1 Glc
　　采用氯

4、磺酸-吡啶法對(duì)白樹(shù)花多糖進(jìn)行了硫酸化修飾，結(jié)果顯示:多糖硫酸化修飾后紅外光譜(IR)出現(xiàn)1250cm-1的S=O特征吸收峰;Sepharose CL-6B柱層析結(jié)果表明硫酸化修飾后多糖樣品的洗脫峰峰位前移，即硫酸基的引入使多糖的分子量明顯增大，多糖中的部分羥基被硫酸酯基團(tuán)所取代。離子色譜法分析測(cè)得硫酸基占14.7％，取代度為Ds=1.41。
　　體外抗凝血研究結(jié)果表明，白樹(shù)花多糖硫酸酯具有良好的抗凝血效果;其抗凝血功能主要通過(guò)抑制

5、內(nèi)源凝血系統(tǒng)的凝血因子發(fā)揮作用，與肝素的抗凝血機(jī)理基本一致，即通過(guò)與抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)結(jié)合，進(jìn)一步抑制凝血因子Ⅱa和Ⅹa而發(fā)揮抗凝血作用;動(dòng)物體內(nèi)抗凝血實(shí)驗(yàn)結(jié)果與體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果是一致的，而且在使用12小時(shí)內(nèi)未發(fā)現(xiàn)對(duì)動(dòng)物血液、肝腎功能有不良影響。
　　肝素在防止血栓形成及治療方面在臨床上廣泛使用，但是存在較多的副作用，因此尋找肝素的替代品一直是備受關(guān)注的研究課題。本研究結(jié)果顯示白樹(shù)花多糖硫酸酯抗凝血效果及初步的安全評(píng)價(jià)均比較良好，具