血鏈球菌細(xì)菌素對念珠菌細(xì)胞表面疏水性和細(xì)胞膜鈣離子通透性的影響.pdf

1、目的：
　　研究研究血鏈球菌細(xì)菌素（Streptococcus sanguis bacteriocin）對單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念珠菌（Candida albicans, C.albicans）及熱帶念珠菌(Candida tropicalis, C.tropicalis）細(xì)胞表面疏水性的影響；研究血鏈球菌細(xì)菌素對單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌細(xì)胞膜鈣離子通透性的影響。進(jìn)一步探討血鏈球菌細(xì)菌素對念珠菌的抑制作用。
　　

2、方法：
　　1.復(fù)蘇并傳代血鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株 ATCC10556，通過低溫高速離心、超聲破碎等方法提取血鏈球菌細(xì)菌素，即血鏈素。
　　2.采用二倍稀釋法將血鏈素稀釋成不同濃度，并使其作用于單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌，于37℃，80rpm恒溫振蕩培養(yǎng)，12小時后，采用平板菌落計數(shù)法觀察血鏈素的最小抑菌濃度（MIC）。
　　3.運(yùn)用微生物黏著碳?xì)浠衔颷1]的方法，將1g/L的血鏈素分別作用于單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念

3、珠菌及熱帶念珠菌，共同于37℃，80rpm恒溫振蕩培養(yǎng)，12小時后測定菌懸液OD值，并計算白色念珠菌及熱帶念珠菌的疏水率。
　　4.分別向單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌菌懸液中裝載鈣離子熒光探針（Fluo-3 AM)，利用激光共聚焦顯微鏡，觀察血鏈素作用12小時后，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
　　結(jié)果：
　　1.血鏈素對單獨(dú)培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌的MIC為0.25g/L，血鏈素對等量混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱

4、帶念珠菌的MIC為0.5g/L。
　　2.血鏈素作用后，單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌的細(xì)胞表面疏水率均明顯降低，與對照組相比具有顯著差異（P<0.05)。
　　3.在血鏈素的作用下，單獨(dú)及混合的白色念珠菌及熱帶念珠菌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度均明顯降低，與對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.血鏈素對單獨(dú)及混合培養(yǎng)的白色念珠菌及熱帶念珠菌具有顯著抑制作用。
　　2.血鏈素可以導(dǎo)致白