血鏈球菌細(xì)菌素的分離、純化及其化學(xué)組成的測定.pdf_第1頁
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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文血鏈球菌細(xì)菌素的分離、純化及其化學(xué)組成的測定姓名：寇育榮申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：潘亞萍20000401將血鏈球菌JFr標(biāo)準(zhǔn)株接種于5000mlTPY液體培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)48小時，培養(yǎng)液用于提取血鏈球菌的細(xì)菌素。2血鏈球菌細(xì)菌素的提純(1)血鏈球菌細(xì)胞外蛋白的粗提將細(xì)菌培養(yǎng)液離心后的上清液，加入無水乙醇，再次低溫離心后，收集沉淀，以真空凍干機(jī)凍干。(2)羥基磷灰石(HA)柱層析將粗提物溶液分

2、別用001M，0075M，014M和02M(pH一72)的磷酸鹽緩沖液進(jìn)行階梯式梯度洗脫，收集洗脫液。(3)中空纖維柱超濾脫鹽、濃縮加蒸餾水將各峰的收集液分別反復(fù)超濾除鹽，直至檢測不出PO。3一為止。濃縮后保存。(4)SephadexG一150凝膠柱層析純化、測分子量將HA柱層析分離后具有抑菌活性的組分上柱，蒸餾水洗脫。測分子量時，以標(biāo)準(zhǔn)物分子量的對數(shù)對記錄儀的走紙長度做圖，得工作曲線。(5)SDSPAGE檢測純度、測亞基分子量將Sep

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