轉錄因子USF1在小鼠牙齒發(fā)育中的作用研究.pdf

1、尼古丁是損害牙胚并造成牙齒發(fā)育異常的重要原因之一,探討它對牙胚毒害作用的分子機制是防治其危害的關鍵.多年來,人們僅從流行病學調查和體內實驗證實了這一現(xiàn)象,最近該科的實驗結果顯示尼古丁干擾了牙乳頭細胞的成熟和它們的重要生理功能;小鼠牙胚中有nAchR表達,尼古丁可通過nAchR損害牙齒發(fā)育并且上調其表達水平,但對于尼古丁這種作用的分子機制并不十分青楚.為了揭示轉錄因子USF1在牙齒發(fā)育過程中的調控作用并在此基礎上探討轉錄因子USF1在尼古

2、丁損害牙齒發(fā)育中的作用機制而進行實驗,其主要研究內容及結果如下:一.轉錄因子USF1在小鼠牙齒發(fā)育中表達的研究; 該部分研究首先應用RT-PCR和Western blot方法確定牙胚中有USF1表達,并在此基礎上觀察了牙齒發(fā)育過程中USF1mRNA和蛋白水平的分布模式.二、轉錄因子USF1對成牙本質細胞功能影響的研究;為了進一步正實轉錄因子USF1在牙齒發(fā)育中的功能,該部分實驗通過體外培養(yǎng)成牙本質細胞MDPC-23,穩(wěn)定轉染USF1和A

3、-USF1表達質粒,并檢測細胞中USF1、骨橋素和TGF-β2表達的變化.三.轉錄因子USF1在尼古丁損害鼠牙齒發(fā)育中的作用研究;為了探討轉錄因子USF1在尼古丁損害牙齒發(fā)育中的作用機制,該部分研究在進一步觀察尼古丁對小鼠牙齒發(fā)育影響的基礎上,檢測尼古丁對成牙本質細胞中轉錄因子USF1轉位、表達水平和細胞內Ca<'2+>濃度等的影響.綜合以上實驗結果,該研究發(fā)現(xiàn)轉錄因子USF1不僅在牙齒發(fā)育過程中有非常特異的時間、空間和細胞類型表達模式