轉(zhuǎn)錄因子USF1在小鼠牙齒發(fā)育中的作用研究.pdf

1、尼古丁是損害牙胚并造成牙齒發(fā)育異常的重要原因之一,探討它對(duì)牙胚毒害作用的分子機(jī)制是防治其危害的關(guān)鍵.多年來(lái),人們僅從流行病學(xué)調(diào)查和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了這一現(xiàn)象,最近該科的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示尼古丁干擾了牙乳頭細(xì)胞的成熟和它們的重要生理功能;小鼠牙胚中有nAchR表達(dá),尼古丁可通過(guò)nAchR損害牙齒發(fā)育并且上調(diào)其表達(dá)水平,但對(duì)于尼古丁這種作用的分子機(jī)制并不十分青楚.為了揭示轉(zhuǎn)錄因子USF1在牙齒發(fā)育過(guò)程中的調(diào)控作用并在此基礎(chǔ)上探討轉(zhuǎn)錄因子USF1在尼古

2、丁損害牙齒發(fā)育中的作用機(jī)制而進(jìn)行實(shí)驗(yàn),其主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:一.轉(zhuǎn)錄因子USF1在小鼠牙齒發(fā)育中表達(dá)的研究; 該部分研究首先應(yīng)用RT-PCR和Western blot方法確定牙胚中有USF1表達(dá),并在此基礎(chǔ)上觀察了牙齒發(fā)育過(guò)程中USF1mRNA和蛋白水平的分布模式.二、轉(zhuǎn)錄因子USF1對(duì)成牙本質(zhì)細(xì)胞功能影響的研究;為了進(jìn)一步正實(shí)轉(zhuǎn)錄因子USF1在牙齒發(fā)育中的功能,該部分實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外培養(yǎng)成牙本質(zhì)細(xì)胞MDPC-23,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染USF1和A

3、-USF1表達(dá)質(zhì)粒,并檢測(cè)細(xì)胞中USF1、骨橋素和TGF-β2表達(dá)的變化.三.轉(zhuǎn)錄因子USF1在尼古丁損害鼠牙齒發(fā)育中的作用研究;為了探討轉(zhuǎn)錄因子USF1在尼古丁損害牙齒發(fā)育中的作用機(jī)制,該部分研究在進(jìn)一步觀察尼古丁對(duì)小鼠牙齒發(fā)育影響的基礎(chǔ)上,檢測(cè)尼古丁對(duì)成牙本質(zhì)細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子USF1轉(zhuǎn)位、表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)Ca<'2+>濃度等的影響.綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,該研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子USF1不僅在牙齒發(fā)育過(guò)程中有非常特異的時(shí)間、空間和細(xì)胞類(lèi)型表達(dá)模式