槐杞黃對(duì)哮喘大鼠Th1、Th2、Th17表達(dá)及肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響.pdf

1、研究背景：
　　 支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱(chēng)哮喘）足呼吸道慢性炎癥性疾病，全世界約有3億哮喘患者，且發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。即往免疫學(xué)機(jī)制研究表明哮喘患者存在Thl/Th2亞群比例失衡和功能失衡，表現(xiàn)為T(mén)h2占優(yōu)勢(shì)和Thl處劣勢(shì)，并認(rèn)為其失衡是哮喘的始動(dòng)機(jī)制和核心。但近年來(lái)逐漸發(fā)現(xiàn)，哮喘的一些實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)和臨床現(xiàn)象并不能完全用Thl/Th2失衡理論來(lái)解釋。Thl7細(xì)胞是近來(lái)發(fā)現(xiàn)的不同于Thl和Th2的另一種CD4+T細(xì)胞的新亞型，Thl7細(xì)胞及相關(guān)

2、細(xì)胞因子參與了哮喘的發(fā)生與發(fā)展。肺泡巨噬細(xì)胞是氣道的主要細(xì)胞，負(fù)責(zé)內(nèi)在免疫防御。肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能受損往往易導(dǎo)致或加重呼吸系統(tǒng)疾病。雖然吸入性糖皮質(zhì)激素能有效控制哮喘癥狀，但部分哮喘病例仍表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作和慢性進(jìn)展，提示有必要深入研究哮喘的發(fā)病機(jī)制和增添新的治療方法。傳統(tǒng)中藥在哮喘治療中的重要輔助價(jià)值近年來(lái)日漸受到重視。
　　 目的：研究卵清蛋白(OVA)致敏哮喘模型大鼠Thl、Th2、Thl7表達(dá)及肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的變化以

3、及槐杞黃的治療效應(yīng)和作用機(jī)制。
　　 方法：將40只4-6周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組（C組）、哮喘模型組（A組）、布地奈德組（B組）、槐杞黃組（H組）和布地奈德+槐杞黃組（B+H組），每組8只SD大鼠。OVA致敏和激發(fā)建立哮喘模型。各組大鼠于末次激發(fā)后24小時(shí)處死，取血漿、支氣管肺泡灌洗液(BALF)及右肺上葉組織。右肺上葉組織制作石蠟切片，HE染色，觀(guān)察肺組織病理學(xué)改變；計(jì)數(shù)BALF細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類(lèi)；分離、純化BAL

4、F的肺泡巨噬細(xì)胞，采用比色測(cè)定細(xì)胞吞噬的中性紅以檢測(cè)其吞噬功能；酶聯(lián)免設(shè)吸附試驗(yàn)(ELISA)方法測(cè)定血漿和BALF上清液的IL-4、IFN-γ、IL-17濃度。
　　 結(jié)果：
　　 1.一般觀(guān)察：A組大鼠經(jīng)腹腔注射致敏和霧化激發(fā)，出現(xiàn)不同程度的煩躁不安、呼吸急促、腹肌抽搐等癥狀，嚴(yán)重者呼吸減慢、節(jié)律不規(guī)則、行動(dòng)遲緩、反應(yīng)不敏捷，C組大鼠無(wú)上述癥狀。B組、H組、B+H組大鼠癥狀較A組不同程度減輕。以B組和B+H組改善明顯

5、。
　　 2.肺組織病理學(xué)改變：A組氣道周?chē)罅垦装Y細(xì)胞浸潤(rùn)、管腔狹窄，支氣管管腔內(nèi)可見(jiàn)粘液栓，氣道上皮脫落等哮喘改變；C組則無(wú)上述表現(xiàn)；B組、H組、B+H組比A組不同程度減輕，B組和B+H組較H組減輕明顯。
　　 3.血漿和BALF IL-4、IFN-γ,IL-17濃度：
　　 (1)血漿和BALF IL-4濃度：A組高于C組（p<0.05），B組和B+H組低于A組（p＜0.05），B+H組低于H組（p<0.0

6、5），H組與A組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05），B+H組與B組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 (2)血漿和BALF IFN-γ濃度：A組低于C組（p<0.05），B組、H組和B+H組高于A組(P<0.05)，B+H組高于B組和H組(P<0.05)
　　 (3)血漿和BALF IL-17濃度：A組高于C組(p<0.05），B組和B+H組低于A組(P<0.05)，H組與A組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.0

7、5)，B+H組低于B組和H組（p<0.05），B組低于H組(P<0.05)。
　　 4.BALF細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)：A組細(xì)胞總數(shù)高于C組(P<0.05)，，B組、H組和B+H組低于A組（p<0.05），B+H組低于B組、H組(P<0.05)。其中，嗜酸性細(xì)胞(EOS)百分比：A組高于C組(p<0.05)，B組、H組和B+H組低于A組（p<0.05），B+H組低于B組和H組(P<0.05)；中性粒細(xì)胞(NEU)百分比：A組高于

8、C組(P<0.05)，B組和B+H組低于A組（p<0.05），B+H組低于H組(p<0.05），B+H組與B組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。
　　 5.肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬功能：A組低于C組(P<0.05)，B組低于A組(P<0.05)，H組、B+H組高于A組(P<0.05)，H組、B+H組高于B組（p<0.05），B+H組與H組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 6.血漿和BALF IL-17濃度與BALF

9、 NEU百分比、EOS百分比正相關(guān)（p<0.05），血漿和BALF IFN-γ濃度與肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬功能正相關(guān)(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.哮喘大鼠存在Thl/Th2/Thl7失衡，表現(xiàn)為T(mén)h1功能低下，Th2、Th17功能亢進(jìn)的免疫表型，并同時(shí)表現(xiàn)為肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能下降。
　　 2.吸入性糖皮質(zhì)激素能在一定程度上糾正哮喘大鼠的Thl/Th2/Thl7失衡，但其不能糾正哮喘大鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬