淡水淹溺大鼠肺泡表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白質(zhì)A的表達(dá)及意義.pdf

1、目的與意義：
　　近年來淹溺事件頻繁發(fā)生，逐漸成為人類意外死亡的重要原因，對于淹溺發(fā)病機(jī)制的研究可為早期救治提供理論依據(jù)。
　　本實(shí)驗(yàn)以大鼠為研究對象，建立淡水淹溺性肺損傷大鼠模型，動態(tài)觀察淹溺后大鼠呼吸、血?dú)饧捌胀ú±淼淖兓攸c(diǎn)，并在淹溺后不同時(shí)間點(diǎn)測定SP-A，觀察SP-A的變化特點(diǎn)及其與淹溺性肺損傷間的關(guān)系，探討淹溺性肺損傷的發(fā)病機(jī)制，為臨床救治提供新思路。
　　材料與方法：
　　1．動物分組：24只SD大

2、鼠，體重205±10g，隨機(jī)分為對照組（6只）和實(shí)驗(yàn)組（18只），再將實(shí)驗(yàn)組分為淹溺后2h組、淹溺后4h組和淹溺后6h組，每個(gè)亞組6只大鼠。
　　2．建立模型：25％烏拉坦腹腔注射全身麻醉（5mL/kg），將大鼠仰臥固定于鼠臺上，頸正中切口，分離氣管并切開，插入套管，右側(cè)頸動脈插入靜脈留置針，供采血用。實(shí)驗(yàn)組大鼠氣管插管連接10mL注射器，抬高鼠臺與桌面呈45°角，向鼠肺內(nèi)灌入淡水8mL/kg，分次于1min內(nèi)灌完，復(fù)制淡水淹溺肺

3、損傷大鼠模型，實(shí)驗(yàn)動物氧合指數(shù)＜300mmHg的為淹溺性肺損傷大鼠。
　　3．方法：分別在灌注后2、4及6h記錄大鼠的呼吸頻率，經(jīng)頸動脈采血測血?dú)?，處死大鼠后取左下肺肺組織置于10％福爾馬林液中固定、包埋、切片行HE及免疫組織化學(xué)染色，取右下肺組織存于液氮罐中，采用RT-PCR方法檢測SP-AmRNA水平。
　　結(jié)果：
　　1．呼吸頻率及總體反應(yīng)
　　灌注淡水后，實(shí)驗(yàn)組動物首先出現(xiàn)呼吸停止，隨后呼吸頻率明顯增加。

4、灌注后2h實(shí)驗(yàn)組動物呼吸頻率減慢，但始終高于正常水平。部分大鼠出現(xiàn)氣管內(nèi)泡沫樣液體流出、呼吸頻率不規(guī)律及四肢抽搐。
　　2．實(shí)驗(yàn)組大鼠動脈血?dú)獾淖兓?br>　　實(shí)驗(yàn)組大鼠灌入淡水后PaO2降低，隨后逐漸回升，但一直維持在較低水平，與對照組比較差異顯著（P<0.05）。大鼠灌入淡水后PaCO2先升高，隨后逐漸降低，接近正常范圍，與對照組比較差異顯著（P<0.05）。
　　3．病理學(xué)變化
　　HE染色發(fā)現(xiàn)對照組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)

5、完整，肺泡腔及間質(zhì)內(nèi)很少見紅細(xì)胞聚集及中性粒細(xì)胞浸潤；實(shí)驗(yàn)組肺泡結(jié)構(gòu)有不同程度的破壞，肺間隔斷裂，可見部分區(qū)域肺泡塌陷和擴(kuò)張、肺泡腔內(nèi)可見紅細(xì)胞聚集、肺毛細(xì)血管充血、擴(kuò)張、肺間隔增厚，肺泡腔及間質(zhì)可見中性粒細(xì)胞浸潤。
　　4．SP-A表達(dá)的變化
　　SP-A免疫組織化學(xué)陽性染色呈棕黃色。對照組大鼠SP-A主要以膜狀形式連續(xù)分布于肺泡腔表面，部分肺泡上皮細(xì)胞漿內(nèi)也可見到棕色顆粒。在實(shí)驗(yàn)組肺泡腔內(nèi)很少見到膜狀顯色，多以顆粒狀染色