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文檔簡介
1、目的:
通過用不同劑量的外源性H2S干預(yù)百草枯中毒后的大鼠,并分別檢測干預(yù)前后的大鼠肺泡表面活性物質(zhì)含量的變化。探討在百草枯所致急性肺損傷模型中,外源性H2S對(duì)肺泡表面活性物質(zhì)表達(dá)的影響。
分組及方法:
選取健康清潔級(jí) SD(sprague-dawley)大鼠60只(體重200±20g),采用完全隨機(jī)分組法分成6組(10只/組),分組如下:空白對(duì)照組(K組,注射用生理鹽水2ml/kg),百草枯組(P組,百草
2、枯80mg/kg),百草枯+低劑量NaHS組(L組,百草枯80mg/kg+NaHS0.78mg/kg),百草枯+中劑量NaHS組(M組,百草枯80mg/kg+NaHS1.56mg/kg),百草枯+高劑量 NaHS組(H組,百草枯80mg/kg+NaHS3.12mg/kg),NaHS組(N組,NaHS3.12mg/kg)。
按照實(shí)驗(yàn)分組分別以生理鹽水及百草枯灌胃,3小時(shí)后按預(yù)先分組分別腹腔內(nèi)注射NaHS及生理鹽水。百草枯灌胃24
3、小時(shí)后處死大鼠,采集肺組織標(biāo)本及肺泡灌洗液。將肺組織切片、染色后,用光學(xué)顯微鏡觀察各組肺組織的病理損傷變化,并予肺損傷病理學(xué)評(píng)分。檢測肺組織中SP-A、B、C mRNA基因表達(dá)水平(RT-PCR法)的變化,以及各組BALF中TP(BCA法)與TPL(比色法)含量的變化。記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并統(tǒng)計(jì)處理。
結(jié)果:
1.肺組織病理學(xué)改變
?。?)大體觀: K組肺組織外觀呈淡粉色,肺表面光滑,未見水腫或出血點(diǎn)。P組肺組織外觀
4、呈暗紅色,明顯充血水腫,見大片出血灶。L組外觀較P組無明顯改善,M組及H組肺組織充血水腫程度較依次緩解。N組與K組外觀大致相同。
(2)鏡下觀:K組肺泡結(jié)構(gòu)基本正常。P組可見肺組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞和紊亂,偶有肺泡塌陷,肺泡內(nèi)大量炎癥細(xì)胞浸潤并有紅細(xì)胞大量滲出,肺間質(zhì)明顯增寬,肺水腫明顯,部分肺泡內(nèi)有透明膜形成,肺組織病理學(xué)評(píng)分(IQA)顯著升高。與P組相比,L組肺損傷情況無明顯改善;M、H組肺損傷較P組有所減輕,但損傷情況較K組仍
5、很明顯。N組與K組鏡下觀大致相同。
2.肺組織中SP-A、SP-B與SP-C mRNA的表達(dá)情況
與K組相比,P組及L組的肺組織中SP-A、SP-B與SP-C mRNA基因表達(dá)水平均有明顯降低。M、H組肺組織中SP-A、SP-B與SP-C mRNA基因表達(dá)均較L組有所升高;N組肺組織SP-A、SP-B與SP-C mRNA基因表達(dá)與K組基本一致。
3.BALF中TP和TPL含量的變化
與K組相比,P
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