耐大環(huán)內(nèi)酯類藥物解脲脲原體23SrRNA位點(diǎn)突變的研究.pdf

1、目的支原體作為人類泌尿生殖道感染主要的病原體之一，近年來隨著發(fā)病率逐年上升，越來越受到人們的重視，其中解脲脲原體引起的感染占到90﹪以上。由于臨床抗生素治療的不規(guī)范性，使得解脲脲原體的耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重，尤其是對(duì)目前廣泛使用的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，本課題就是進(jìn)行耐大環(huán)內(nèi)酯類藥物的解脲脲原體同其 23SrRNA上位點(diǎn)突變的相關(guān)性研究。 方法將108例來自我院婦科和皮膚科門診患者的泌尿生殖道標(biāo)本拭子平行接種支原體的培養(yǎng)加藥敏液體培養(yǎng)基和

2、選擇性固體培養(yǎng)基，記錄2種培養(yǎng)方法的結(jié)果及藥敏結(jié)果；從中選擇耐大環(huán)內(nèi)酯類藥物常見表型的 14 例菌株作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本：用MB Advanted DNA Analysis 6.83軟件比對(duì)解脲脲原體已知的14個(gè)血清型的23 SrRNA上2050-2620位的序列差異；用primer premier 5.0軟件設(shè)計(jì)針對(duì)Uu 14個(gè)血清型該段序列的特異性引物；用PCR方法對(duì)該段進(jìn)行擴(kuò)增，產(chǎn)物提純后進(jìn)行DNA測序；將測序結(jié)果與genbank中的已知

3、序列比較位點(diǎn)的變化。 結(jié)果以固體培養(yǎng)基上生長的典型支原體菌落結(jié)合生化反應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)，108 份標(biāo)本中固體培養(yǎng)基檢出支原體 37 例，液體培養(yǎng)基報(bào)告陽性結(jié)果 41例，2種培養(yǎng)基結(jié)果完全相同的89例。9株對(duì)羅紅霉素高度耐藥、阿齊霉素中等耐藥的菌株目的序列與解脲脲原體微小脲原體種的4個(gè)血清型序列一致：5株對(duì)羅紅霉素、阿齊霉素均高度耐藥的菌株所測序列與解脲脲原體中解脲脲原體種的10個(gè)血清型該段序列比較有C2243N(C or T)位點(diǎn)的突