源自SPF雞群內(nèi)源性ALV-SD0501全基因序列鑒定分析及感染性分子克隆pSD0501的構(gòu)建.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文源自SPF雞群內(nèi)源性ALVSD0501全基因序列鑒定分析及感染性分子克隆pSD0501的構(gòu)建姓名：孔義波申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：姜世金20080610源自SPF雞群內(nèi)源性ALV／SD0501全基岡鑒定分析及感染性分了：克隆pSD0501的構(gòu)建一列同源性在985％以上，全基因組序列同源性在991％以上，而與其他亞群代表株同源性相對較低，env基因同源性僅為563％“915％。以測序完成的ALV／

2、SD0501株env基因序列為模板，設(shè)計引物進行PCR擴增，酶切，連入pGEX6P1載體，轉(zhuǎn)化BL21菌株，初步鑒定后，經(jīng)測序驗證無誤，IPTG誘導(dǎo)表達，SDSPAGE分析表明目的基因得到了比較高效的表達，切膠回收原核表達目的蛋白，免疫小鼠，制備抗血清。為今后更加深入的研究工作奠定了必要的基礎(chǔ)。以測序完成的內(nèi)源性ALV／SD0501株全基因組cDNA為模版，采用PCR方法分5段擴增出ALV／SD0501株的前病毒基因組，PCR產(chǎn)物順次連