2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文氣道ai1通道干預(yù)對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎的影響姓名:汪毅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師:鄭春泉20120405復(fù)旦大學(xué)博士論文結(jié)果:PANC1細(xì)胞經(jīng)LentiORAllshRNA感染后可表達(dá)慢病毒所攜帶的GFP基因而發(fā)出綠色熒光,當(dāng)感染復(fù)數(shù)為10時(shí),LentiORAllshRNA感染PANC1細(xì)胞48小時(shí)后感染效率為9828%,對(duì)細(xì)胞ORAll基因的轉(zhuǎn)錄抑制效率為905%;而用于對(duì)照的空載慢病毒在相同條

2、件下感染效率為9875%,對(duì)ORAll基因的轉(zhuǎn)錄抑制效率為3%。小鼠鼻腔感染LentiORAllshRNA后,鼻黏膜ORAllmRNA水平隨感染時(shí)間逐漸降低,至第3天時(shí)達(dá)最低,隨后逐漸升高,感染后一月左右OrailmRNA水平仍低于正常對(duì)照組水平。ARLI組小鼠鼻黏膜與脾臟ORAllmRNA水平均較AR組下降,其鼻黏膜Orail蛋白表達(dá)水平也低于AR組小鼠,末次鼻腔激發(fā)后撓鼻數(shù)與噴嚏數(shù)較AR組小鼠也都明顯減少;ARGFP組小鼠鼻黏膜與脾

3、臟ORAllmRNA水平,Orail表達(dá)水平及末次激發(fā)后噴嚏數(shù)與撓鼻數(shù)與AR組小鼠相比均無(wú)明顯差異。免疫組化結(jié)果提示ARLI組小鼠鼻黏膜上皮層與固有層、鼻黏膜相關(guān)淋巴組織、脾臟生發(fā)中心等部位Orail表達(dá)均較AR組小鼠減少。ARLI組小鼠鼻黏膜與脾臟中LTC4S、EAR3、germlineC£與IL4的mRNA水平均明顯低于AR組小鼠,其鼻腔灌洗液中LTC4、OVAIgE與IL4的濃度以及血清中LTC4、ECP、OVAIgE與IL一4的

4、濃度也均低于AR組小鼠,ARGFP組小鼠鼻黏膜與脾臟中LTC4S、EAR3、germlineC£與IL一4的mRNA水平與AR組小鼠無(wú)明顯差異,其鼻腔灌洗液與血清中LTC4、ECP、OVAIgE與IL4的濃度與AR組小鼠也無(wú)明顯差異。AR組小鼠鼻黏膜中IL33、IL17E與TSLP的表達(dá)水平均明顯高于正常對(duì)照組小鼠,ARLI組小鼠鼻黏膜中IL一33與TSLP的表達(dá)水平較AR組有所下降,但I(xiàn)L17E的表達(dá)水平與AR組相比無(wú)明顯差異。ARG

5、FP組小鼠鼻黏膜中IL33、IL17E與TSLP的表達(dá)水平與AR組小鼠相比均無(wú)明顯差異。結(jié)論:成功構(gòu)建針對(duì)ORAll基因進(jìn)行RNA干擾的重組慢病毒Lenti—ORAll一shRNA;LentiORAllshRNA能夠成功感染PANC一1細(xì)胞并有效抑制ORAll基因的轉(zhuǎn)錄水平。LentiORAllshRNA鼻腔滴入可成功感染小鼠鼻黏膜細(xì)胞,感染后第3天對(duì)ORAll基因的轉(zhuǎn)錄抑制效率達(dá)到最高。變應(yīng)性鼻炎小鼠LentiORAllSllI礬A鼻

6、腔干預(yù)后可有效下調(diào)其鼻黏膜與脾臟中Orail表達(dá)水平,并減輕其鼻炎癥狀。下調(diào)鼻黏膜中Orail表達(dá)不僅可降低變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻黏膜中肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、B細(xì)胞與Th2細(xì)胞中相關(guān)炎性介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄與釋放,也可降低全身如脾臟與血清中上述免疫細(xì)胞炎性介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄與釋放。LentiORAllshRNA鼻腔干預(yù)對(duì)小鼠變應(yīng)性鼻炎炎癥的抑制作用可能與其阻礙了鼻黏膜上皮細(xì)胞中IL一33與TSLP蛋白的合成和表達(dá)有關(guān)關(guān)鍵詞:Orail;小鼠:變應(yīng)性鼻炎:慢病

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