化療后骨髓再生細胞移植治療局灶性腦缺血.pdf

1、背景: 近年來關(guān)于干細胞研究取得諸多突破性進展，其中骨髓干細胞(bone marrow stem cells, BMSCs)由于其來源方便、含量豐富、在體內(nèi)外多向分化潛能的發(fā)現(xiàn)及在臨床疾病治療中的廣泛應用，深受人們關(guān)注。研究結(jié)果表明，骨髓干細胞對缺血性腦損傷具有極大的治療潛能。盡管現(xiàn)在對其移植入腦內(nèi)后是否具有功能和轉(zhuǎn)分化潛能存在很大爭議，但是其能夠分泌大量營養(yǎng)因子，提高受損大腦的可塑性，同時激活內(nèi)源性修復機制從而發(fā)揮其對缺血性腦損傷的治

2、療價值，而這些功能的發(fā)揮并不需要其在移植后轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元與宿主結(jié)構(gòu)相整合。 目的: 建立改良的大鼠大腦中動脈線栓模型；并將骨髓細胞和5-氟尿嘧啶(5-FU)化療后的骨髓再生細胞(bone marrow regenerative cells, BMRCs)經(jīng)尾靜脈移植入模型大鼠體內(nèi)，然后觀察這兩種細胞在模型大鼠腦中存活的情況，以及對病灶腦組織結(jié)構(gòu)和神經(jīng)功能恢復的影響，并進一步探討這兩種細胞在治療腦缺血中的價值及機制。 材料

3、和方法: 采用經(jīng)過本人摸索改良的方法建立大鼠大腦中動脈線栓(MCAO)模型，隨機分為對照組(control group)、骨髓細胞移植組(BMCs group)、5-FU化療后骨髓再生細胞移植組(BMRCs group)。模型成功后分別于術(shù)后24h經(jīng)尾靜脈注射磷酸鹽緩沖(PBS)、新鮮骨髓細胞懸液(DAPI標記)和5-FU化療后骨髓再生細胞懸液(DAPI標記)各1ml。各組大鼠分別于術(shù)后應用熒光激發(fā)檢測移植的細胞在腦內(nèi)存活情況，采用尼氏

4、染色和免疫組化檢測缺血區(qū)病理改變及新生血管情況，采用TTC染色檢測腦梗死體積，應用采用改良神經(jīng)功能損害評分(modified Neurological Severity Scores, mNSS)評價治療前后的神經(jīng)功能情況。 結(jié)果: 兩類細胞移植組在熒光激發(fā)下均可見DAPI 標記的細胞在梗塞區(qū)及其周邊區(qū)聚集并存活；移植后2W組織學觀察，與對照組相比兩移植組梗塞區(qū)腦組織結(jié)構(gòu)恢復較好；免疫組組化和行為學檢測顯示這兩種細胞都能夠減少半

5、暗帶區(qū)細胞凋亡、促進半暗帶區(qū)VEGF mRNA的表達、促進血管再生、減少半暗帶區(qū)細胞凋亡、減少腦梗死體積并促進行為學功能的恢復（與對照組相比P<0.05），并以5-FU化療后骨髓再生細胞的治療效果較顯著（與骨髓細胞組相比P<0.05）。 結(jié)論: 骨髓細胞和5-FU化療后骨髓再生細胞經(jīng)靜脈移植后在宿主腦內(nèi)均能夠存活，均能減少半暗帶區(qū)細胞凋亡、促進半暗帶區(qū)VEGF mRNA的表達、促進血管再生、減少半暗帶區(qū)細胞凋亡、減少腦梗死體積并