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文檔簡(jiǎn)介
1、背景: 近年來關(guān)于干細(xì)胞研究取得諸多突破性進(jìn)展,其中骨髓干細(xì)胞(bone marrow stem cells, BMSCs)由于其來源方便、含量豐富、在體內(nèi)外多向分化潛能的發(fā)現(xiàn)及在臨床疾病治療中的廣泛應(yīng)用,深受人們關(guān)注。研究結(jié)果表明,骨髓干細(xì)胞對(duì)缺血性腦損傷具有極大的治療潛能。盡管現(xiàn)在對(duì)其移植入腦內(nèi)后是否具有功能和轉(zhuǎn)分化潛能存在很大爭(zhēng)議,但是其能夠分泌大量營(yíng)養(yǎng)因子,提高受損大腦的可塑性,同時(shí)激活內(nèi)源性修復(fù)機(jī)制從而發(fā)揮其對(duì)缺血性腦損傷的治
2、療價(jià)值,而這些功能的發(fā)揮并不需要其在移植后轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元與宿主結(jié)構(gòu)相整合。 目的: 建立改良的大鼠大腦中動(dòng)脈線栓模型;并將骨髓細(xì)胞和5-氟尿嘧啶(5-FU)化療后的骨髓再生細(xì)胞(bone marrow regenerative cells, BMRCs)經(jīng)尾靜脈移植入模型大鼠體內(nèi),然后觀察這兩種細(xì)胞在模型大鼠腦中存活的情況,以及對(duì)病灶腦組織結(jié)構(gòu)和神經(jīng)功能恢復(fù)的影響,并進(jìn)一步探討這兩種細(xì)胞在治療腦缺血中的價(jià)值及機(jī)制。 材料
3、和方法: 采用經(jīng)過本人摸索改良的方法建立大鼠大腦中動(dòng)脈線栓(MCAO)模型,隨機(jī)分為對(duì)照組(control group)、骨髓細(xì)胞移植組(BMCs group)、5-FU化療后骨髓再生細(xì)胞移植組(BMRCs group)。模型成功后分別于術(shù)后24h經(jīng)尾靜脈注射磷酸鹽緩沖(PBS)、新鮮骨髓細(xì)胞懸液(DAPI標(biāo)記)和5-FU化療后骨髓再生細(xì)胞懸液(DAPI標(biāo)記)各1ml。各組大鼠分別于術(shù)后應(yīng)用熒光激發(fā)檢測(cè)移植的細(xì)胞在腦內(nèi)存活情況,采用尼氏
4、染色和免疫組化檢測(cè)缺血區(qū)病理改變及新生血管情況,采用TTC染色檢測(cè)腦梗死體積,應(yīng)用采用改良神經(jīng)功能損害評(píng)分(modified Neurological Severity Scores, mNSS)評(píng)價(jià)治療前后的神經(jīng)功能情況。 結(jié)果: 兩類細(xì)胞移植組在熒光激發(fā)下均可見DAPI 標(biāo)記的細(xì)胞在梗塞區(qū)及其周邊區(qū)聚集并存活;移植后2W組織學(xué)觀察,與對(duì)照組相比兩移植組梗塞區(qū)腦組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)較好;免疫組組化和行為學(xué)檢測(cè)顯示這兩種細(xì)胞都能夠減少半
5、暗帶區(qū)細(xì)胞凋亡、促進(jìn)半暗帶區(qū)VEGF mRNA的表達(dá)、促進(jìn)血管再生、減少半暗帶區(qū)細(xì)胞凋亡、減少腦梗死體積并促進(jìn)行為學(xué)功能的恢復(fù)(與對(duì)照組相比P<0.05),并以5-FU化療后骨髓再生細(xì)胞的治療效果較顯著(與骨髓細(xì)胞組相比P<0.05)。 結(jié)論: 骨髓細(xì)胞和5-FU化療后骨髓再生細(xì)胞經(jīng)靜脈移植后在宿主腦內(nèi)均能夠存活,均能減少半暗帶區(qū)細(xì)胞凋亡、促進(jìn)半暗帶區(qū)VEGF mRNA的表達(dá)、促進(jìn)血管再生、減少半暗帶區(qū)細(xì)胞凋亡、減少腦梗死體積并
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