局灶性腦缺血后抑郁及其生物學(xué)機(jī)制的初步研究.pdf

1、本研究通過(guò)觀察缺血性腦損傷后動(dòng)物在2周束縛應(yīng)激后的抑郁行為變化和腦內(nèi)CRF和NPY蛋白的表達(dá)情況，旨在探討缺血性腦損傷后腦內(nèi)CRF和NPY蛋白表達(dá)和束縛應(yīng)激的反應(yīng)及其與動(dòng)物抑郁行為之間的關(guān)系。本課題的開(kāi)展為深入了解腦卒中后抑郁的生物學(xué)機(jī)制、提高缺血性腦損傷后的康復(fù)水平和生活質(zhì)量有意義。 選用我校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的雄性SD大鼠，運(yùn)用線栓法建立動(dòng)物局灶性腦缺血/再灌注模型，并在自制束縛應(yīng)激裝置中行應(yīng)激處理。通過(guò)神經(jīng)癥狀評(píng)級(jí)、網(wǎng)屏、抓

2、握牽引、旋轉(zhuǎn)棒和平衡木試驗(yàn)，并聯(lián)合腦組織HE染色，綜合評(píng)定動(dòng)物腦缺血損傷后不同時(shí)刻的神經(jīng)與運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況及表現(xiàn)。在此工作基礎(chǔ)上施加2周的束縛應(yīng)激，通過(guò)曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳、蔗糖水消耗試驗(yàn)和免疫組織化學(xué)染色方法觀察束縛應(yīng)激后腦缺血/再灌注動(dòng)物的抑郁行為變化和腦內(nèi)CRF和NPY蛋白的表達(dá)情況，探討局灶性腦缺血后腦內(nèi)CRF和NPY蛋白表達(dá)的反應(yīng)性及其與抑郁行為變化之間的關(guān)系。 研究結(jié)果：(1)線栓致腦缺血再灌注手術(shù)后，動(dòng)物出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功

3、能缺陷和運(yùn)動(dòng)障礙(P＜0.01)。在術(shù)后第2～4天，動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)迅速，第5天時(shí)已基本達(dá)到術(shù)前水平；而神經(jīng)功能的恢復(fù)較慢。術(shù)前和術(shù)后第28天的神經(jīng)癥狀等級(jí)和運(yùn)動(dòng)功能測(cè)定結(jié)果之間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。腦組織大體標(biāo)本可見(jiàn)壞死的缺血灶，HE染色后肉眼可見(jiàn)缺血損傷區(qū)著色淺，與正常組織之間界限明確。梗死灶遍及大腦中動(dòng)脈支配區(qū)，同時(shí)伴有損傷同側(cè)大腦半球的萎縮和腦室擴(kuò)大。光鏡下觀察，可見(jiàn)缺血區(qū)神經(jīng)細(xì)胞排列極其紊亂并有大量核固縮現(xiàn)象，壞死灶周

4、圍有大量神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生。(2)2周束縛應(yīng)激后，MCAO手術(shù)+應(yīng)激組動(dòng)物的蔗糖水偏好比以及水平運(yùn)動(dòng)得分、垂直運(yùn)動(dòng)得分與其他組比均顯著降低(P＜0.01)，表現(xiàn)出探索行為減少、對(duì)新鮮環(huán)境的好奇程度降低；快感缺失、對(duì)獎(jiǎng)賞的反應(yīng)能力下降的特點(diǎn)。而其他組動(dòng)物的各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯差異(P＞0.05)。(3)2周束縛應(yīng)激后，MCAO手術(shù)+應(yīng)激組動(dòng)物腦內(nèi)下丘腦室旁核(PVN)、杏仁核中央亞核(CeA)及終紋床核(BNST)均有較強(qiáng)CRF陽(yáng)性表達(dá)，

5、部分大腦皮質(zhì)(cortex，Cort)神經(jīng)元中亦可見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)。CRF免疫陽(yáng)性神經(jīng)元以梭形或雙極細(xì)胞為主，亦可見(jiàn)多極細(xì)胞，胞質(zhì)內(nèi)陽(yáng)性產(chǎn)物著色較淡，呈細(xì)顆粒狀均勻分布，神經(jīng)纖維細(xì)長(zhǎng)深染，細(xì)胞核未見(jiàn)著色。其他組動(dòng)物腦內(nèi)的對(duì)應(yīng)核團(tuán)中也可見(jiàn)到CRF免疫陽(yáng)性神經(jīng)元，但數(shù)量明顯少于缺血組(P＜0.01)。此外，MCAO手術(shù)+應(yīng)激組動(dòng)物腦內(nèi)與應(yīng)激和情緒密切相關(guān)核團(tuán)的NPY表達(dá)明顯減少，與其他組相比均具有顯著性差異(P＜0.01)。 上述結(jié)果提示