局灶性腦缺血后對(duì)增生細(xì)胞核抗原表達(dá)與細(xì)胞凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究局灶性腦缺血成熟大鼠模型缺血2小時(shí)后不同再灌注時(shí)間點(diǎn)的增生細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá),同時(shí)用TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,研究細(xì)胞核增生抗原修復(fù)表達(dá)與凋亡二者的相互關(guān)系,并研究促神經(jīng)生長(zhǎng)藥物腦復(fù)康對(duì)PCNA表達(dá)和神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響,為進(jìn)一步對(duì)腦缺血早期干預(yù)治療的研究提供有益的思路.方法:按照Hagasawa線栓法建立大腦中動(dòng)脈阻塞模型,對(duì)大鼠局灶性腦缺血2小時(shí)后再灌注0、1、3、6、12、24、36h、48h,采用SABC

2、法檢測(cè)PCNA的蛋白表達(dá),TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,TTC法觀察梗塞區(qū)面積.結(jié)果:在大腦中動(dòng)脈阻塞2小時(shí)后,在缺血皮質(zhì)、海馬、下丘腦、尾殼核可見PCNA陽性細(xì)胞表達(dá)高低與再灌注的時(shí)程不同,以再灌注12小時(shí)單純?nèi)毖退幬锔深A(yù)組表達(dá)最高,隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng),PC NA的表達(dá)逐漸下降,48小時(shí)PCNA少量表達(dá)但仍略高于正常對(duì)照組.實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較有顯著性差異.給予腦復(fù)康干預(yù)治療后,上述不同時(shí)間點(diǎn)PC NA表達(dá)均有所增加.TTC

3、染色后可見梗塞區(qū)蒼白色,面積約1.0×0.7cm<'2>,梗塞區(qū)周圍染色為紫紅色.TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡在再灌注1小時(shí)開始出現(xiàn),隨著缺血再灌注時(shí)間延長(zhǎng),凋亡細(xì)胞越來越多,48小時(shí)達(dá)到高峰.增生細(xì)胞核抗原標(biāo)記指數(shù)(PI)與細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)在再灌注12小時(shí)內(nèi)隨著再灌注時(shí)間延長(zhǎng)都呈增加趨勢(shì),PI大于AI,但AI在12小時(shí)后仍呈增加趨勢(shì),而PI呈下降趨勢(shì).結(jié)論:1 說明成熟大鼠缺血神經(jīng)元自身具有一定的修復(fù)能力.2 藥物干預(yù)應(yīng)在缺血早期12