干細(xì)胞移植在局灶性腦缺血后神經(jīng)功能缺損治療中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文干細(xì)胞移植在局灶性腦缺血后神經(jīng)功能缺損治療中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：張卉申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：王紀(jì)佐2003.3.1博士研究生學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)思路實(shí)驗(yàn)思路實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾接懢衷钚阅X缺血后CNS的自身修復(fù)情況以及兩種不同的干細(xì)胞移植對于神經(jīng)功能恢復(fù)的影響。實(shí)驗(yàn)方法：采用雄性Wistar大鼠制作局灶性腦缺血模型；體外分離、純化并培養(yǎng)NSCs及BMSCs，然后通過立體定向技術(shù)進(jìn)行移植。‘‘I第一部分大鼠局灶性腦

2、缺血后內(nèi)源性神經(jīng)前體細(xì)胞的激活目的：探討大鼠局灶性腦缺血后的自身修復(fù)的發(fā)生和發(fā)展情況EvansBlue及TTC染色：明確腦缺血模型的制作是否成功及梗塞的范圍HE染色：觀察組織學(xué)變化Nesdn染色：了解局灶性腦缺血后神經(jīng)前體細(xì)胞標(biāo)記物的變化及分布BrdU染色：了解局灶性腦缺血所引起的細(xì)胞增殖的變化情況Nestin、NSE及GFAPmRNA檢測：了解局灶性腦缺血后的神經(jīng)發(fā)生4JI第二部分神經(jīng)干細(xì)胞在局灶性腦缺血后神經(jīng)功能缺損治療中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)

3、研究目的：探討NSCs移植對于大鼠局灶性腦缺血后神經(jīng)功能缺損的影響體辮實(shí)驗(yàn)MTT檢測：了解細(xì)胞的存活情況Nestin、BrdU、PCNA染色：驗(yàn)證NSCs的增殖能力及其標(biāo)記物NSE、MAP一2、NF：驗(yàn)證NSCs分化的神經(jīng)元GFAP及GalC染色：驗(yàn)證NSCs分化的星形和少突膠質(zhì)細(xì)胞蔣內(nèi)實(shí)驗(yàn)神經(jīng)功能缺損評分：檢測神經(jīng)功能缺損的程度Nestin染色：了解受體鼠腦中移植細(xì)胞及自身前體細(xì)胞的變化情況BrdU染色：了解移植細(xì)胞在受體鼠腦中的分布