降脂消毒飲對大鼠酒精性脂肪肝并腸源性內(nèi)毒素血癥模型的干預作用及機制研究.pdf

1、目的：建立 SD大鼠酒精性脂肪肝（AFL）并腸源性內(nèi)毒素血癥（IETM）模型，并研究降脂消毒飲對AFL并IETM模型的治療作用、保護作用及部分機制。
　　方法：①建立AFL并IETM模型：模型組、乳果糖組依次以30％、40%、50%的酒精15m1·Kg-1·d-1按周遞增灌胃，每日早晚分兩次灌胃，同時給予5%的酒精為唯一飲料，自第3周乳果糖組增加乳果糖（1.35g·Kg-1·d-1）灌胃，正常組、模型組給予等體積生理鹽水，時間均為

2、7周。并自第3周末開始每組各抽取6只，觀察肝指數(shù)、血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、血清D乳酸（D-LAC）和二胺氧化酶（DAO）、血漿內(nèi)毒素（LPS）、肝臟病理形態(tài)學指標。②降脂消毒飲對AFL并IETM模型的治療作用、保護作用及量效關(guān)系：建立大鼠AFL并IETM動物模型。并分別在中斷酒精刺激和繼續(xù)酒精刺激的情況下，以降脂消毒飲半量（7.88g·kg-1·d-1）、常量（15.75g·kg-1·d-1）、2倍

3、量（31.5g·kg-1·d-1）、4倍量（63g·kg-1·d-1）、8倍量（126g·kg-1·d-1）、護肝片（0.39g·kg-1·d-1）、乳果糖（1.35g·Kg-1·d-1）進行干預。觀察肝指數(shù)、血清 AST和ALT、肝臟組織甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）、血漿LPS、肝臟病理形態(tài)學指標。③降脂消毒飲對AFL并IETM模型保護作用的機制：建立大鼠AFL并IETM模型。在繼續(xù)酒精刺激的情況下，以降脂消毒飲4倍的劑量（63

4、g·kg-1·d-1）進行干預。觀察指標有血清AST和ALT、血漿LPS、血清D-LAC和DAO、白細胞分化抗原14（CD14）基因和蛋白表達、TOLL樣受體4（TLR4）基因和蛋白表達、清道夫受體（SR）基因和蛋白表達、肝組織和血清白細胞介素1（IL-1）、白細胞介素6（IL-6）、白細胞介素8（IL-8）、白細胞介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子 a（TNF-a）、γ干擾素（IFN-γ）。④降脂消毒飲對高脂飲食誘導的脂肪肝動物模型

5、的治療作用、保護作用：以高脂飼料喂養(yǎng)誘導大鼠脂肪肝動物模型，并分別在中斷高脂飼料和繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)的情況下，以藥物降脂消毒飲（15.75g· kg-1· d-1）、血脂康（0.14g·kg-1·d-1）、辛伐他?。?.9mg·kg-1·d-1）進行干預。觀察指標有肝指數(shù)、血清AST和ALT、肝臟組織和血清TG和TC、肝臟病理形態(tài)學指標。
　　結(jié)果：①造模5周模型組各項指標符合AFL的要求，同時血漿LPS水平明顯高于正常組（P﹤0.

6、05），且模型組血漿LPS水平與腸黏膜通透性（血清D-LAC和DAO）、肝損傷程度（血清AST、ALT）表現(xiàn)一致。②治療作用及量效關(guān)系：降脂消毒飲常量組各指標的改善總體上優(yōu)于護肝片組、乳果糖組；2倍組、4倍組、8倍組的治療作用優(yōu)于其它組，而2倍組、4倍組、8倍組總體療效相當；在不超過2倍劑量時，隨著劑量增加，各指標也相應地改善。保護作用及量效關(guān)系：降脂消毒飲常量組各指標的改善總體上優(yōu)于護肝片組、乳果糖組；4倍組、8倍組的保護作用優(yōu)于其它

7、組，4倍組、8倍組療效相當；在8倍劑量范圍內(nèi)，隨著降脂消毒飲劑量的增加，各指表也相應地改善。③模型組和4倍組血清D-LAC、DAO水平的變化與血漿LPS、血清AST和ALT水平變化一致；模型組和4倍組CD14、TLR4基因水平和蛋白表達、及 IL-1、IL-6、IL-8、TNF-a、IFN-γ水平與血漿 LPS、血清 AST和ALT水平變化一致，而SR基因和蛋白表達及IL-10水平與血漿LPS、血清AST和ALT變化相反。④降脂消毒飲組

8、對高脂飲食誘導的脂肪肝模型各指標的改善總體上優(yōu)于血脂康組、辛伐他汀組。
　　結(jié)論：①以上述方法5周可成功建立AFL并IETM動物模型；各種原因?qū)е履c黏膜通透性的升高是血液中LPS升高的主因，IETM在酒精性肝損傷中可能具有重要作用；通過減少腸道對LPS的吸收，抑制血液中LPS的水平，可一定程度上抑制內(nèi)毒素性肝損傷。②在中止酒精刺激和繼續(xù)酒精刺激的情況下，降脂消毒飲對大鼠AFL并IETM都具有良好的療效，中藥復方降脂消毒飲有可能開發(fā)

9、成為一種新型的治療AFL并IETM和防止其進一步進展的有效藥物；降脂消毒飲2倍劑量為治療大鼠AFL并IETM的最佳劑量；降脂消毒飲4倍劑量為防止大鼠AFL并IETM的進展的最佳劑量；治療作用量效關(guān)系：在不超過2倍劑量時，隨著劑量增加，療效也相應地增加，而2倍、4倍、8倍劑量療效相當，無明顯的量效關(guān)系；保護作用量效關(guān)系：在8倍劑量范圍內(nèi)，隨著降脂消毒飲劑量的倍數(shù)增加，其療效也相應的增加，但其療效的增加并不呈倍數(shù)關(guān)系。③降脂消毒飲可以通過改

10、善因酒精刺激造成的腸黏膜通透性改變，保持腸黏膜的完整性，從而抑制腸道 LPS滲漏入血，改善LPS性肝損傷；降脂消毒飲上調(diào)SR基因和蛋白表達及抗炎因子IL-10水平，下調(diào)CD14、TLR4基因和蛋白表達，從而抑制LPS-TLR4信號通路中炎癥因子的釋放，改善 LPS性肝損傷。④在中斷高脂飼料和繼續(xù)高脂飼料情況下，降脂消毒飲對高脂飲食誘導的大鼠脂肪肝模型都具有較明顯的療效；降脂消毒飲對酒精和高脂飲食復合因素誘導的脂肪肝模型可能同樣有良好療效