Egr-1在大鼠酒精性脂肪肝中的表達(dá)及水飛薊素對(duì)其干預(yù)作用.pdf

1、研究背景：酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明。近年來,發(fā)現(xiàn)促炎性轉(zhuǎn)錄因子及炎性因子參與了酒精性脂肪肝的病理損傷過程,對(duì)酒精性脂肪肝的發(fā)生發(fā)展中起著十分重要的作用。早期生長(zhǎng)反應(yīng)因子-1(earlygrowthresponse-1,Egr-1)是一種重要的促炎性核轉(zhuǎn)錄因子,被認(rèn)為是早期炎性調(diào)節(jié)的關(guān)鍵因子之一。近年來發(fā)現(xiàn)Egr-1在肝損傷中具有雙重作用,一方面它具有保護(hù)作用,另一方面它可以上調(diào)TNF-α的表達(dá),啟動(dòng)早期炎癥反應(yīng)。Egr-1

2、參與了酒精性脂肪肝的早期炎癥反應(yīng)過程,其機(jī)制不甚清楚,可能是上調(diào)了腫瘤壞死因子-α(tumorNecrosisFactor-α,TNF-α)的表達(dá),進(jìn)而引起炎癥反應(yīng)。水飛薊素具有強(qiáng)力抗氧化作用,是一種安全、穩(wěn)定、有效的保肝藥物。因此,本實(shí)驗(yàn)通過建立酒精性脂肪肝模型,探討Egr-1在大鼠酒精性脂肪肝中的表達(dá)以及水飛薊素對(duì)酒精性脂肪肝的保護(hù)作用是否與抑制Egr-1的表達(dá)有關(guān)。
　　目的：探討Egr-1在大鼠酒精性脂肪肝中的表達(dá)以及水飛

3、薊素對(duì)酒精性脂肪肝的保護(hù)作用是否與抑制Egr-1的表達(dá)有關(guān)。
　　方法：55只雌性SD大鼠隨機(jī)分成4組:正常組、模型組、水飛薊素低劑量組(100mg/kg)、水飛薊素高劑量組(200mg/kg)。采用高脂飲食聯(lián)合酒精灌胃6周建立大鼠酒精性脂肪肝模型。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanineaminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartateaminotransferase,AST)活性、總膽固醇(t

4、otalcholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)水平;生化法檢測(cè)肝臟組織TG水平。HE染色觀察肝臟病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肝臟Egr-1、TNF-α、IL-6的表達(dá);蛋白免疫印跡(WesternBlot)法檢測(cè)肝臟Egr-1的表達(dá)。
　　結(jié)果：模型組與正常組比較,肝細(xì)胞腫脹明顯,可見大小不等的脂肪空泡,脂滴彌漫,炎細(xì)胞浸潤(rùn),部分可見Mallory小體和點(diǎn)狀、灶狀壞死及變性(P<0.01)。模

5、型組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性明顯升高(P<0.01,P<0.05),TG、TBIL水平明顯升高(分別是P<0.01,P<0.05);模型組肝組織中TG水平明顯上升(P<0.01);與模型組相比,水飛薊素高劑量組肝組織病理變化程度明顯減輕(P<0.01),血清ALT、AST活性明顯降低(P<0.05),肝臟組織TG含量顯著下降(P<0.01);免疫組化結(jié)果顯示,Egr-1、TNF-α、IL-6在模型組表達(dá)量較正

6、常組明顯升高(P<0.01),而在水飛薊素高劑量組則較模型組顯著降低(P<0.01,P<0.05);蛋白免疫印跡(WesternBlot)結(jié)果表明,與正常組相比,模型組大鼠肝組織中Egr-1的表達(dá)量升高明顯(P<0.05),而水飛薊素高劑量組能減少Egr-1的表達(dá)(P<0.05)。
　　結(jié)論：Egr-1在乙醇引起的大鼠脂肪肝肝組織中表達(dá)明顯升高,提示可能參與了酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制。水飛薊素對(duì)酒精性脂肪肝具有一定的保護(hù)作用,其保護(hù)