通心絡(luò)對(duì)動(dòng)物缺氧耐受力及血管內(nèi)皮功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：缺氧是臨床上許多疾病所共有的一個(gè)基本病理過(guò)程，是心腦血管疾病最常見(jiàn)的損傷因素，宗氣由自然界之清氣和脾胃運(yùn)化的水谷精氣相結(jié)合而成，長(zhǎng)期吸入天之清氣（氧氣）不足可以導(dǎo)致宗氣虛證的發(fā)生。本研究從缺氧與中醫(yī)宗氣虛相關(guān)性切入，探討益氣通絡(luò)方通心絡(luò)對(duì)急、慢性缺氧動(dòng)物機(jī)體耐受力及血管內(nèi)皮功能的影響，并闡明其作用機(jī)制，為其有效防治缺氧及以缺氧為病理基礎(chǔ)的循環(huán)系統(tǒng)疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：⑴實(shí)驗(yàn)一通心絡(luò)對(duì)急性缺氧小鼠存活時(shí)間的影響。健

2、康KM種小鼠40只按體重隨機(jī)分為急性缺氧組（對(duì)照組）、通心絡(luò)大、中、小劑量組，每組10只。通心絡(luò)各用藥組小鼠按0.1ml/10g體重分別給予通心絡(luò)超微粉（分別為1.52、0.76、0.38g生藥/kg）連續(xù)灌胃給藥3天；急性缺氧組小鼠則灌胃等體積生理鹽水。于末次灌胃給藥后1h后，將小鼠放入盛有5g鈉石灰的廣口瓶，閉密瓶口，記錄小鼠存活時(shí)間。⑵實(shí)驗(yàn)二通心絡(luò)對(duì)慢性缺氧大鼠血?dú)夥治鲋笜?biāo)的影響。清潔級(jí)雄性Wistar大鼠40只按體重隨機(jī)分為空白

3、對(duì)照組、缺氧模型組、通心絡(luò)大、小劑量組，每組10只。缺氧模型組大鼠置于自制常壓低氧艙內(nèi)，艙內(nèi)氧體積分?jǐn)?shù)維持在（10.0±0.5）％，每天7h，每周6天。通心絡(luò)各用藥組在缺氧模型組的基礎(chǔ)上，于實(shí)驗(yàn)開始按1ml/100g體重給予通心絡(luò)超微粉混懸液灌胃（分別為1.2g生藥/kg和0.6g生藥/kg）。實(shí)驗(yàn)共計(jì)5周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)用血?dú)夥治鰞x測(cè)定各組大鼠動(dòng)脈血二氧化碳分壓（PaCO2）、氧分壓（PaO2）及血氧飽和度（SaO2）。⑶實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、分

4、組、造模方法同實(shí)驗(yàn)二，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后光鏡觀察胸主動(dòng)脈內(nèi)膜病理學(xué)變化，透射電鏡觀察主動(dòng)脈組織內(nèi)皮細(xì)胞（EC）超微結(jié)構(gòu)變化；放免法檢測(cè)血漿內(nèi)皮素（ET），硝酸還原酶法間接檢測(cè)血清一氧化氮（NO），雙抗夾心ELISA法測(cè)定血管性假性血友病因子（vWF）。⑷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、分組、造模方法同實(shí)驗(yàn)二，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后檢測(cè)NEI網(wǎng)絡(luò)中相關(guān)指標(biāo)的變化。
　　 結(jié)果：①剛放入缺氧瓶時(shí)小鼠表現(xiàn)很活躍，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，小鼠出現(xiàn)躁動(dòng)不安，呼吸頻率加快，隨著缺氧程度加深小

5、鼠皮膚變白，唇色發(fā)紺，突然間出現(xiàn)驚跳，四肢抽搐，有呼吸暫停的驚厥現(xiàn)象，最后呼吸停止死亡。②急性缺氧組、通心絡(luò)大、中、小劑量組小鼠的存活時(shí)間（min）分別為34.61±4.64、47.83±4.74、43.67±9.36、44.14±7.66。與急性缺氧組比較，通心絡(luò)各用藥組小鼠存活時(shí)間明顯延長(zhǎng)（P<0.01），但各組間比較無(wú)顯著差異（P>0.05）。③與空白對(duì)照組比較，缺氧模型組大鼠動(dòng)脈PaO2顯著下降，統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異（P<0.05

6、）PaCO2和SaO2與空白對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P0.05）。與缺氧模型組比較，通心絡(luò)各用藥組PaO2明顯升高（P<0.05），PaCO2和SaO2與缺氧模型組比較無(wú)明顯變化（P>0.05）。④缺氧模型組：內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、分布不均勻、密度增加或減少，內(nèi)膜增厚、內(nèi)膜內(nèi)有炎細(xì)胞浸潤(rùn)、內(nèi)彈力板有斷裂；平滑肌細(xì)胞排列紊亂、水腫，彈力纖維變薄。⑤與空白對(duì)照組比較，缺氧模型組大鼠血漿ET-1與vWF明顯增加，血清NO含量顯著下降，具有顯著性差異（

7、P<0.01）。⑥與空白對(duì)照組比較，缺氧模型組大鼠下丘腦組織中CRH含量明顯減少（P<0.01）；血漿ACTH及血清CORT含量明顯升高（P<0.01）。⑦與缺氧模型組比較，通心絡(luò)大劑量組血清腎上腺素（E）水平顯著下降（P<0.01），但通心絡(luò)小劑量組無(wú)明顯變化；通心絡(luò)大、小劑量組血清去甲腎上腺素（NE）水平顯著下降，統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異（P<0.01）。
　　 結(jié)論：⑴通心絡(luò)可明顯延長(zhǎng)急性缺氧條件下小鼠的存活時(shí)間，提高慢性缺氧條

8、件下大鼠的血氧分壓，表明通心絡(luò)可提高動(dòng)物的缺氧耐受力。⑵缺氧可明顯導(dǎo)致大鼠血管內(nèi)皮損傷與功能障礙，通心絡(luò)可顯著改善受損的血管內(nèi)皮功能。⑶缺氧狀態(tài)下存在機(jī)體全身性NEI網(wǎng)絡(luò)穩(wěn)態(tài)機(jī)制失調(diào)，主要表現(xiàn)在交感.腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)和下丘腦一垂體.腎上腺皮質(zhì)軸功能亢進(jìn)。典型相關(guān)分析顯示缺氧大鼠血管內(nèi)皮功能相關(guān)生化指標(biāo)與NEI網(wǎng)絡(luò)相關(guān)因子密切相關(guān)，提示NEI網(wǎng)絡(luò)功能紊亂可能是缺氧狀態(tài)下血管內(nèi)皮損傷的機(jī)制之一。⑷通心絡(luò)改善缺氧狀態(tài)下血管內(nèi)皮功能作用機(jī)制與調(diào)節(jié)