外源性ATP對大鼠移植胰腺缺血-再灌注損傷保護(hù)作用的實驗研究.pdf

1、目的:研究外源性三磷酸腺苷(ATP)對大鼠移植胰腺細(xì)胞死亡方式的影響，探討外源性ATP對大鼠移植胰腺缺血/再灌注損傷(IR/I)的作用及可能機制。 方法:102只SD大鼠隨機分成3組：1)正常對照組(6只)，僅行開腹、暴露胰腺手術(shù)。2)移植對照組(24對)，供體胰十二指腸單純用4℃肝素平衡鹽液(150u/ml，15～20m1)灌注并保存60 min后行移植手術(shù)。3)ATP組(24對)，供體胰十二指腸用4℃肝素平衡鹽液添加ATP(

2、5mmol/L，15～20m1)進(jìn)行灌注并保存60min后行移植手術(shù)。后兩組根據(jù)移植后再灌注時間再分為移植對照0、1、6、12h組和ATP0、1、6、12h組。高效液相色譜儀檢測胰腺組織ATP、ADP、AMP含量，光鏡、電鏡觀查胰腺組織病理學(xué)變化，血糖儀測定各組大鼠血糖值，全自動生化儀檢測血清中脂肪酶、淀粉酶含量，流式細(xì)胞儀雙染色法檢測胰腺組織凋亡細(xì)胞、脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。 結(jié)果:1)移植對照0h、1h組胰腺組織ATP含量明顯低于正

3、常對照組(Oh組，P<0.01；1h組，P<0.05)；ATP0h、lh組胰腺組織ATP含量較移植對照組明顯升高(0h組，P<0.01；lh組，P<0.05)。2)光鏡檢查見移植對照Oh組胰腺細(xì)胞輕度水腫，1h組炎細(xì)胞浸潤明顯，6h、12h組出現(xiàn)出血、腺泡壞死；ATP組與移植對照組相比胰腺組織病理學(xué)評分明顯降低(水腫、出血、炎細(xì)胞浸潤評分，P<0.05；腺泡壞死評分，P<0.01)。3)電鏡檢查見移植對照Oh、lh組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾

4、基復(fù)合體腫脹較輕，6h、12h組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾基復(fù)合體腫脹進(jìn)一步加重，可見自噬體和自噬空泡顯著增多；ATP組與移植對照組相比細(xì)胞器損傷明顯減輕。4)移植對照1h、6h、12h組和ATPlh、6h、12h組血清淀粉酶、脂肪酶含量均較正常對照組明顯升高(ATP組脂肪酶，P<0.05：移植對照組淀粉酶和脂肪酶、ATP組淀粉酶，P<0.01)；ATP6h、12h組血糖、淀粉酶、脂肪酶較同時間點移植對照組明顯降低(血糖及脂肪酶，P<0.05

5、：淀粉酶，P<0.01)。5)移植對照各組和ATP0h、1h組脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯高于正常對照組(移植對照0h、1h、6h組，P<0.01；移植對照12h組和ATP0h、1h組，P<0.05)；ATP各組脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯小于同時間點移植對照組(0h、1h、6h組，P<0.01：12h組，P<0.05)。6)移植對照1h、6h、12h組和ATPlh、6h、12h組凋亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯高于正常對照組(1h、6h組，P<0.01；12h組，P<

6、0.05)，ATPlh組凋亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯高于移植對照1h組(P<0.05)。7)胰腺組織ATP含量與脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.956，P<0.01)，與凋亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)無明顯相關(guān)。 結(jié)論:1)在器官灌注保存液中添加外源性ATP可以增加大鼠胰腺組織ATP含量。2)外源性ATP能夠減輕大鼠移植胰腺病理損傷。3)外源性ATP能夠改善大鼠移植胰腺內(nèi)分泌功能。4)外源性ATP促進(jìn)大鼠移植胰腺損傷細(xì)胞以凋亡方式死亡、減少細(xì)胞脹亡的