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文檔簡介
1、目的：
探討外周血CD4+ CD25+ CD127low調節(jié)性T細胞(regulatory T cells，Tregs)在多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)中的變化及意義;并進一步觀察hepcidin、GDF15在MM相關貧血發(fā)病機制中的作用。
方法：
研究對象為天津醫(yī)科大學總醫(yī)院自2012年12月至2013年10月初治MM患者、經治療后完全緩解的MM患者以及正常對照者。第一部分采用流
2、式細胞術檢測30例初治、27例完全緩解(CR) MM患者以及25名健康成年人外周血CD4+T細胞、Tregs數量，并檢測Tregs表面功能分子CTLA-4及其凋亡相關蛋白CD95、Bcl-2、Caspase3的表達，并分析其與臨床特點及療效的關系。第二部分用熒光定量PCR分別檢測25例MM患者，15名正常對照者外周血單個核細胞HAMPmRNA、GDF15 mRNA的表達水平，并用ELISA方法檢測其血漿hepcidin、GDF15、IL
3、-6和EPO水平，本院臨床檢驗中心檢測鐵蛋白、血清鐵、總鐵結合力和轉鐵蛋白水平。
結果：
第一部分初治組CD4+T細胞占外周血單個核細胞的比例為（29.41±12.56）％明顯低于對照組（31.13±12.38）％（P＜0.05），Ⅲ期初治患者CD4+T細胞為（28.44±13.01）％明顯低于Ⅰ、Ⅱ期患者（36.32±7.24）％(P＜0.05);初治MM組Tregs占CD4+T比例（9.34±4.74）％顯著高于
4、CR組（7.31±2.10）％和正常對照組（6.95±1.59）％（P＜0.05），初治Ⅲ期患者Tregs占CD4+T比例（10.57±5.21）％明顯高于初治Ⅰ、Ⅱ期患者（6.78±2.34）％（P＜0.05）。初治組、CR組和正常對照組Tregs的表面CD95表達分別為(61.30±13.0)％、(59.65±9.68)％、（58.79±9.53）％，三者之間無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），初治組CTLA-4表達（4.65±1.68）
5、％高于CR組（2.83±1.72）％(P＜0.05)和正常對照組（1.64±0.85）％(P＜0.01)，CR患者CTLA-4高于正常對照組(P＜0.05)，初治組Tregs胞漿內Bcl-2水平（772.02±196.34）高于CR組（597.39±126.84）(P＜0.05)和正常對照組（456.93±74.75）(P＜0.01)，CR組高于正常對照組(P＜0.05)，初治組和CR組Tregs胞內Caspase3的水平(32.48±
6、6.97)、(37.69±7.59)低于正常對照組(53.15±3.55)(P＜0.05)。初治組Tregs占CD4+T細胞比例與骨髓瘤數量呈正相關(P＜0.05)，且Tregs比例與治療前后漿細胞下降值成反比（r=0.735，P＜0.05）。第二部分 MM患者外周血單個核細胞HAMP mRNA及GDF15 mRNA的表達分別是正常對照組的（4.32±2.45）倍、（2.41±1.02）倍（P均＜0.01），血漿hepcidin、GDF
7、15、IL-6及EPO水平（分別為63.73±17.46ng/ml、1241.65±688.37pg/ml、11.12±14.46pg/ml、64.44±61.71μIU/ml）較正常對照組(33.25±16.05ng/ml、401.31±92.37pg/ml、2.92±1.97pg/ml、30.70±25.30μIU/ml)均明顯升高（P均＜0.05）;MM患者HAMP mRNA表達與血清鐵蛋白(r=0.68 P＜0.001)、血漿h
8、epcidin水平(r=0.772 P＜0.01)呈正相關，與血紅蛋白水平呈負相關(r=0.596 P＜0.01)，與GDF15 mRNA無相關性;MM患者GDF15 mRNA表達與血漿GDF15水平呈正相關（r=0.645 P＜0.01），與鐵蛋白無相關性;EPO與GDF15有正相關趨勢(r=0.376 P=0.06); MM患者血漿hepcidin和GDF15水平在接受VD方案化療達到完全緩解時較治療前有明顯的下降(hepcidin
9、65.60±21.83ng/ml vs44.33±14.50ng/ml、 GDF151544.83±592.82 pg/ml vs866.48±407.36 pg/ml）（P均＜0.05）。
結論：
第一部分 MM患者外周血Tregs水平升高，與瘤細胞負荷及疾病的分期呈正相關，與療效呈負相關;Tregs水平增高與其抗凋亡能力增強有關;第二部分MM患者HAMP mRNA的過度表達參與鐵代謝異常，是MM相關ACD發(fā)生的重
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