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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)研究益氣活血方對(duì)糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Bax、Bcl-2及Caspase-3的影響,探討益氣活血方對(duì)糖尿病周?chē)窠?jīng)病變的干預(yù)作用,為該方在臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:將40只雄性健康Wistar大鼠,體重240-260g。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)抽取10只作為正常對(duì)照組,給予常規(guī)飼養(yǎng);余30只給予實(shí)驗(yàn)造模,喂養(yǎng)高糖高脂飼料。于第4周末,實(shí)驗(yàn)組給予鏈脲佐菌素STZ(溶于0.1mol/L檸檬酸鹽緩沖液中,pH4
2、.3,4℃)45mg/kg一次性腹腔注射,對(duì)照組腹腔注射等體積的檸檬酸鹽緩沖液。在第6周末,實(shí)驗(yàn)組大鼠測(cè)血糖>16.7mmol/L,且存在胰島素抵抗者,即成模型,成模率90‰共27只。將成模的大鼠27只隨機(jī)分為模型組、中藥組、西藥組3組,每組9只。中藥組給益氣活血方藥(25g/kg.d)灌胃,西藥組給予彌可保(0.5mg/kg.d)灌胃,對(duì)照組和模型組用相同體積蒸餾水灌胃,每日1次,給藥干預(yù)8周。實(shí)驗(yàn)周期內(nèi),測(cè)量大鼠的體重及血糖,并觀察
3、其一般情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)束,用TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡水平和免疫組化方法測(cè)定bax、bcl-2和caspase-3的表達(dá)。
結(jié)果:
1、各組大鼠一般情況
實(shí)驗(yàn)期間,對(duì)照組大鼠基本情況正常;在第3周后,實(shí)驗(yàn)組緩慢出現(xiàn)多飲、多尿、精神萎靡,毛色暗淡無(wú)光澤;第4周實(shí)驗(yàn)組腹腔注射STZ造模4天后,大鼠出現(xiàn)不安定,反應(yīng)遲鈍,被毛蓬松,臀部毛色發(fā)黃,逐漸消瘦;飲水量、食量及尿量明顯增加,大便不成形,籠中墊料
4、酸腐等癥狀;出現(xiàn)糖尿病周?chē)窠?jīng)病變癥狀。從第6周開(kāi)始給予藥物干預(yù)連續(xù)8周期間,除模型組外,中藥組、西藥組大鼠癥狀逐漸減輕,效果隨治療時(shí)間延長(zhǎng)較為明顯。
2、大鼠體重、血糖變化
2.1、大鼠體重變化
1周末時(shí),各組體重差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4周末時(shí),各組體重差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。與正常對(duì)照組相比,各組大鼠體重均有增加(P<0.05);模型組、西藥組、中藥組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意
5、義(P>0.05)。6周末時(shí),各組體重差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。與正常對(duì)照組相比,各組大鼠體重均有增加(P<0.05);模型組、西藥組、中藥組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。藥物干預(yù)8周后,各組之間差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。與正常對(duì)照組相比,各組大鼠體重均下降(P<0.05),以模型組最為明顯>西藥組>中藥組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.2、大鼠血糖變化
1周末時(shí),
6、各組血糖差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4周末時(shí),各組血糖差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。與正常對(duì)照組相比,各組大鼠血糖均有增加(P<0.05);模型組、西藥組、中藥組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。6周末時(shí),各組血糖差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。與正常對(duì)照組相比,各組大鼠血糖均有增加(P<0.05);模型組、西藥組、中藥組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。藥物干預(yù)8周后,各組之間差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001
7、)。與模型組相比,中藥組血糖降低明顯(P<0.05);西藥組對(duì)降低血糖有意義,但是不明顯(P>0.05);中藥組和西藥組相比降糖效果明顯(P<0.05)。
3、坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果
正常對(duì)照組坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡較少,各組大鼠凋亡細(xì)胞均顯著增多(P<0.05);與模型組相比,彌可保組和益氣活血方組大鼠坐骨神經(jīng)凋亡細(xì)胞均顯著減少(P<0.05),以中藥組更為明顯。
4、Caspase-3、Bcl-
8、2及Bax的變化
與正常對(duì)照組相比,其余三組Caspase-3、Bax的表達(dá)均顯著增多,Bcl-2明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。與模型組相比,中藥組和彌可保組Caspase-3、Bax的表達(dá)均顯著減少,Bcl-2明顯提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;中藥組與彌可保組向比較,中藥組具有顯著差異。
結(jié)論:
1、對(duì)于糖尿病的大鼠一般情況、體質(zhì)量、血糖方面,益氣活血方的干預(yù)作用優(yōu)于彌可保。
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