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1、目的: 通過(guò)研究Toll樣受體4(TLR4)在阻塞性黃疸大鼠中的表達(dá)及加味大柴胡湯對(duì)TLR4基因表達(dá)的影響,證明阻黃時(shí)TLR肝臟的表達(dá)和肝功能的損傷存在一定關(guān)系且加味大柴胡湯可以下調(diào)TLR4的表達(dá),減輕阻黃對(duì)肝功能的影響,為進(jìn)一步研究阻塞性黃疸時(shí)肝損傷的分子機(jī)制和加味大柴胡湯在臨床上輔助治療阻塞性黃疸提供新的理論依據(jù)。 方法: 制作阻塞性黃疸大鼠模型,分為7、14、21天3個(gè)時(shí)段,每個(gè)時(shí)段分3組,即:(1)假手術(shù)
2、+生理鹽水組(2ml/次,2次/日,Po)(SO組);(2)膽總管結(jié)扎+生理鹽水組(2ml/次,2次/日,Po)(BDL+NS組);(3)膽總管結(jié)扎+加味大柴胡湯組(12.4g/kg/日,2次/日,Po)(BDL+MMDB組)。每組6只SPF級(jí)SD大鼠,在各時(shí)段取大鼠肝組織及下腔靜脈血,檢測(cè)AST、ALB、TB;觀察肝組織的HE染色病理改變;用免疫組化檢測(cè)TLR4蛋白表達(dá);用RT-PCR檢測(cè)TLR4mRNA的表達(dá)。 結(jié)果:
3、 1、血清學(xué)TB、AST、ALB測(cè)定 膽總管結(jié)扎7天時(shí),BDL+MMDB組與BDL+NS組外周血TB、AST比SO組均上升,且后者明顯。BDL+MMDB 組與SO組及BDL+NS組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。膽總管結(jié)扎14、21天時(shí),BDL+MMDB組與BDL+NS組外周血TB、AST持續(xù)升高,且后者增高更明顯。BDL+MMDB組與SO組及BDL+NS組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。而三個(gè)時(shí)間段的AL
4、B的含量逐漸降低。BDL+MMDB組與SO組及BDL+NS組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2、肝組織TLR4蛋白的表達(dá) TLR4蛋白的染色陽(yáng)性產(chǎn)物分布于細(xì)胞漿/膜中。各時(shí)段檢測(cè)結(jié)果:SO 組肝細(xì)胞中輕度表達(dá)。膽總管結(jié)扎7、14、21 天時(shí),BDL+MMDB組與BDL+NS組TLR4蛋白表達(dá)持續(xù)顯著增加,且后者增加更明顯。同時(shí)段中BDL+MMDB組與SO 組相比、BDL+MMDB 組與BDL+NS組相比,差異
5、均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3、肝組織TLR4mRNA 的表達(dá) 正常肝組織中TLR4mRNA 的表達(dá)不明顯。膽總管結(jié)扎7、14、21天時(shí),BDL+MMDB 組與 BDL+NS 組TLR4 蛋白表達(dá)持續(xù)顯著增加,且后者增加更明顯。同時(shí)段中BDL+MMDB組與SO組相比、BDL+MMDB組與BDL+NS組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論: 1、膽道梗阻時(shí),AST、TB的含量增加,而ALB
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