人參皂甙Rb1對人表皮黑素細胞黑素生長的影響.pdf

1、目的:皮膚中黑素含量是決定皮膚顏色的主要因素之一。黑素細胞產(chǎn)生黑素,并將其輸送到周圍的角質(zhì)形成細胞,從而影響皮膚的顏色。黑素細胞生成黑素的不足可以導(dǎo)致皮膚色素減退或脫失,促進黑素細胞的黑素生成是治療色素脫失性疾病的策略之一。酪氨酸酶是黑素細胞產(chǎn)生黑素的關(guān)鍵酶。近年研究發(fā)現(xiàn),酪氨酸酶主要受小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的調(diào)控,而MITF的表達又受到上游蛋白如cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)的影響。中藥人參曾被用于白癜風(fēng)等脫色素性疾病

2、的治療,而Rbl是中藥人參的主要有效成分之一。近年來有報道人參皂甙Rb1具有抗健忘、抗衰老、抗氧化、抗凋亡,促進神經(jīng)纖維形成并保持其功能、等多重作用。黑素細胞和神經(jīng)細胞在胚胎發(fā)生中同源,但人參皂甙Rb1對黑素細胞黑素生成的作用尚未見報道。本文研究人參皂甙Rb1對人表皮黑素細胞黑素生成的影響及其作用機制,以探討其用于治療色素脫失性皮膚病的前景。
　　 方法:將黑素細胞進行原代培養(yǎng)、傳代,選取第2-5代黑素細胞進行實驗,采用MTT法

3、測定細胞增殖情況,氧化多巴法測定酪氨酸酶活性,氫氧化鈉裂解法測定黑素生成,免疫蛋白印記法測定酪氨酸酶和小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達及cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)的激活。
　　 結(jié)果:加入25-100μg人參皂甙Rb1作用72h后,黑素細胞活力無明顯影響,細胞酪氨酸酶活性和黑素含量呈濃度依賴性增強;100μM人參皂甙Rb1作用72h后,酪氨酸酶、MITF蛋白表達明顯增加,CREB明顯激活。10μM的蛋白激酶A(P