硝菔通結(jié)顆粒通便效應(yīng)及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：在既往藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床研究證明硝菔通結(jié)顆粒能有效治療便秘的基礎(chǔ)上，探討便秘的中醫(yī)病理機(jī)制及硝菔通結(jié)顆粒的立法原則與處方配伍特點(diǎn)。同時(shí)，通過觀察便秘小鼠排黑糞時(shí)間及數(shù)量情況，以反映該藥物瀉下作用的強(qiáng)弱；通過觀察黑色碳末在便秘小鼠小腸及大鼠大腸的推進(jìn)距離，以反映該藥對(duì)腸道平滑肌的影響，從而判斷其對(duì)大鼠腸道運(yùn)動(dòng)的作用；通過測量便秘小鼠不同腸段水分的含量，以反映該藥對(duì)大鼠腸道的水分含量的增加情況，從而判斷其主要作用部位；通過觀察硝菔通結(jié)顆

2、粒對(duì)便秘大鼠血漿MTL、SS含量的變化，以從放免角度闡明該藥對(duì)便秘的作用機(jī)制。 方法： 理論探討：搜集并總結(jié)歷代論述便秘的相關(guān)文獻(xiàn)，同時(shí)結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)便秘的研究進(jìn)展，探討便秘的中醫(yī)病因、病機(jī)、理法方藥及硝菔通結(jié)顆粒的立法原則與配伍特點(diǎn)。 實(shí)驗(yàn)研究：1.對(duì)便秘小鼠排便時(shí)間及粒數(shù)的影響：將小鼠60只隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、麻仁丸組、硝菔通結(jié)顆粒大、中、小劑量組，每組10只。除對(duì)照組外，其余各組灌服地芬諾酯混懸液復(fù)制便

3、秘模型成功后，對(duì)照組和模型組每天給予生理鹽水灌胃，其余各組灌食含有2％墨汁的相應(yīng)液體。給藥后連續(xù)觀察8h，記錄小鼠第一次排黑便時(shí)間，4h內(nèi)、8h小鼠排出干糞便總粒數(shù)、干糞便重量、稀糞點(diǎn)數(shù)和不排便動(dòng)物數(shù)。 2.對(duì)便秘小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響：分組及給藥同實(shí)驗(yàn)一。末次給藥30min后，各組小鼠均按0.02ml/g的劑量給予碳末混懸液，再過后20min，小鼠脫頸椎處死，測量幽門至回腸部的長度及從幽門至墨汁前沿的距離，計(jì)算墨汁推進(jìn)百分率，并注

4、意觀察各組小腸容積是否增大。 3.對(duì)便秘大鼠大腸動(dòng)力的影響：將60只大鼠禁食不禁水12h后麻醉，在腹中線做一切口，把塑料管由回盲部插入結(jié)腸1cm，結(jié)扎固定，并通過肌肉皮膚從背部引出，以備給藥。次日將60只大鼠分為6組，分組、造模方法、各組所給藥物均同實(shí)驗(yàn)一。末次給藥30min后，所有大鼠灌注含有2％墨汁的藥液后立即計(jì)時(shí)；另外60只所灌食液中不含色素指示劑。灌胃后立即淺麻醉，沿腹中線做切口找到回盲部，灌注含墨汁的生理鹽水。在靠近回

5、盲部的回腸用雙線做結(jié)扎，在兩線之間剪斷回腸并計(jì)時(shí)。10分鐘后將大鼠處死，測量結(jié)腸總長度和墨汁推進(jìn)距離，計(jì)算墨汁推進(jìn)百分率。 4.對(duì)便秘小鼠不同腸段水分吸收的影響：動(dòng)物、分組及給藥量均同實(shí)驗(yàn)一。給藥后2h將小鼠處死，后剪開腸系膜，自幽門下端用線結(jié)扎，剪斷腸管；再于回盲部上邊結(jié)扎，剪斷腸管，取出該段小腸。再于直腸末端結(jié)扎，剪斷腸管，取出大腸。分別稱量各鼠的小腸和大腸濕重并記錄，然后將各鼠小腸和大腸放在干燥箱里烘干，取出稱重。用公式計(jì)

6、算腸內(nèi)水分含量。 5.對(duì)便秘大鼠血漿及腸組織中MTL、SS含量的影響：動(dòng)物、分組及給藥量均同實(shí)驗(yàn)三。各組血漿標(biāo)本的留?。河盟幗Y(jié)束后，各組大鼠麻醉，股靜脈采血2ml，注入特殊料管中混勻，離心15min，取血漿250μl，-20℃以下保存待檢。各組腸組織勻漿標(biāo)本留?。荷鲜龃笫蠊伸o脈采血后，迅速剖腹，在十二指腸與空腸交接取0.5cm長的腸組織，立即液氮凍存。測胃動(dòng)素樣品處理：小腸組織加入冰醋酸1ml，煮沸10min，勻漿，加入PBS1

7、ml，同上方法保存。測生長抑素樣品處理：小腸組織于煮沸的9g/L氯化鈉溶液1ml中煮沸3min，冷卻后加入冰醋酸0.5ml于勻漿器中制成勻漿，再用氫氧化鈉溶液0.5ml中和，同上方法保存。采用放射免疫分析非平衡法測定。 結(jié)果： 理論研究：便秘的主要病位在肺、脾、胃、大腸，氣陰虧虛，推動(dòng)乏力，腸道失潤，糟粕停聚為慢性便秘的主要病機(jī)，治當(dāng)益氣養(yǎng)陰，軟堅(jiān)潤燥，運(yùn)下通便。 實(shí)驗(yàn)研究：1.對(duì)便秘小鼠排便時(shí)間及粒數(shù)的影響：與

8、模型組比較，對(duì)照組、XFTJH、XFTJM、XFTJL及麻仁丸組均能縮短便秘小鼠首次排便的時(shí)間、增加排便重量和排便粒數(shù)(P<0.05)。與麻仁丸組比較，XFTJH有顯著性差異(P<0.05)。 2.對(duì)便秘小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響：與模型組比較，XFTJH、XFTJM對(duì)便秘模型小鼠的小腸蠕動(dòng)和推進(jìn)速度有非常顯著性差異(P<0.01)，呈劑量依賴性；與麻仁丸組比較，則差異亦有顯著性(P<0.05)。 3。對(duì)便秘大鼠大腸動(dòng)力的影響：

9、與模型組比較，XFTJH、XFTJM對(duì)便秘模型大鼠的大腸蠕動(dòng)和推進(jìn)速度有非常顯著性差異(P<0.01)；與麻仁丸組比較，XFTJH、XFTJM有顯著性差異(P<0.05)。 4.對(duì)便秘小鼠不同腸段水分吸收的影響：與模型組比較，XFTJH、XFTJM、XFTJL、麻仁丸組均可使小鼠大腸水份含量增加(P<0.05)，而以XFTJH最為明顯(P<0.01)；XFTJH亦可使小鼠小腸水份含量增加，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)

10、，而麻仁丸組對(duì)其小腸水份含量沒有影響(P>0.05)；與麻仁丸組比較，XFTJH、XFTJM對(duì)鼠大腸水分含量有差異性(P<0.05)。 5.對(duì)便秘大鼠血漿及腸組織中MTL、SS含量的影響：在灌喂XFTJ后，血漿及腸組織中MTL明顯增加，SS明顯降低，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，尤以大劑量最為顯著(P<0.01)，與麻仁丸組比較，只有硝菔通結(jié)大劑量有顯著性(P<0.05)。 結(jié)論：XFTJ組方嚴(yán)謹(jǐn)，針對(duì)病機(jī)，