凍存神經(jīng)異體移植在大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)中應(yīng)用的研究.pdf

1、骨盆及其周圍的軟組織是結(jié)締組織腫瘤的好發(fā)部位之一,由于早期癥狀不明顯,骨盆惡性腫瘤在發(fā)現(xiàn)時已處于中晚期,瘤塊較大,與周圍組織界限不清。手術(shù)是治療骨盆腫瘤的主要方法,與傳統(tǒng)的截肢術(shù)相比,骨盆區(qū)域的保肢手術(shù)顯得十分重要。
　　 徹底切除腫瘤是開展骨盆保肢手術(shù)和治愈惡性腫瘤的條件。而侵犯到股神經(jīng)或坐骨神經(jīng)成了治療骨盆惡性骨腫瘤手術(shù)保肢的禁忌癥之一,在一定的程度上限制了保肢術(shù)的進展。
　　 目前采用低溫冷凍后進行神經(jīng)的異體移植,

2、已經(jīng)得到肯定。本實驗通過液態(tài)氮冷存降低同種異體神經(jīng)的免疫原性,作為基礎(chǔ)條件,探討和研究不同長度神經(jīng)缺損修復(fù)后的生理功能,為臨床骨盆惡性腫瘤中壓迫神經(jīng)所導(dǎo)致的手術(shù)禁忌提供新的思路。
　　 目的:
　　 本研究通過人工切除坐骨神經(jīng)的方法建立SD大鼠模型,通過顯微外科的方法將不同長度的坐骨神經(jīng)切除,將原先制備好的凍存同種異體神經(jīng)進行移植,通過足跡和形態(tài)學檢測的方法,觀察移植后神經(jīng)的功能,并為臨床骨盆惡性腫瘤中壓迫神經(jīng)所導(dǎo)致的手

3、術(shù)禁忌提供新的思路。
　　 方法:
　　 選擇60只健康SD大鼠,雌雄各半,隨機分為12組,每組5只,其中大鼠異體神經(jīng)移植分為坐骨神經(jīng)移植10 mm組(A1)、15 mm組(A2)、20 mm組(A3)、25 mm組(A4)；凍存神經(jīng)移植分為坐骨神經(jīng)移植10 mm組(B1)、15 mm組(B2)、20 mm組(B3)、25 mm組(B4)；自體神經(jīng)移植分為坐骨神經(jīng)移植10 mm組(C1)、15 mm組(C2)、20 mm

4、組(C3)、25 mm組(C4)。
　　 分別測定大鼠的坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(sciatic nerve function index,SFI),用以評估其神經(jīng)功能狀態(tài),其中SFI值:-100為完全損傷,0為未損傷；選定在術(shù)前和術(shù)后12 W進行足印檢測；測定腓腸肌濕重,記錄術(shù)側(cè)(右側(cè))占正常側(cè)(左側(cè))百分比結(jié)果；應(yīng)用免疫組織化學方法觀察移植神經(jīng)遠端坐骨神經(jīng)軸索中神經(jīng)微絲蛋白(neurofilament protein,NFP)的表達

5、,來測定神經(jīng)再生的能力。
　　 結(jié)果:
　　 1.各組大鼠SFI:
　　 B3組SFI為(-80.49±0.3)C3(-73.27±2.41)差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 2.各組大鼠腓腸肌濕重(％):
　　 術(shù)后12 W,A2(25.71±1.90),B2(41.79±6.46),C2(56.78±1.85)差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；B4(24.62±7.65),C4(30.

6、09±1.52)差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 3.各組大鼠的NFP:
　　 B4(55.33±9.02),C4(682.67±147.80)差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)A3(85.33±36.95),B3(395.00±48.57),C4(682.67±147.80)差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4.透射電鏡觀察結(jié)果:
　　 A3組中雪旺細胞稀少,胞漿薄,核膜不完整,無髓鞘出現(xiàn)

7、,結(jié)締組織增生明顯。B3組中雪旺細胞較少,胞漿稀薄,核膜較完整,線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)少,結(jié)締組織增生。C3組中雪旺細胞多,胞漿飽滿,核膜完整,形態(tài)佳,髓鞘完整,厚度適中,線粒體和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富。
　　 結(jié)論:
　　 通過實驗我們得到在大鼠神經(jīng)移植過程中,凍存異體神經(jīng)移植在神經(jīng)移植長度≤20 mm內(nèi),神經(jīng)再生能力與自體神經(jīng)移植相當,相對于神經(jīng)移植長度>20 mm的凍存異體神經(jīng)移植和異體神經(jīng)移植,其神經(jīng)再生能力增強。并為臨床骨盆惡