TGF-β1和β-catenin基因在病理性瘢痕中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　 病理性瘢痕是人體皮膚組織損傷后的一種纖維過(guò)度增生性疾病,分為增生性瘢痕和瘢痕疙瘩兩種類(lèi)型。病理性瘢痕不僅是局部形態(tài)的改變,瘢痕過(guò)度收縮還能引起器官的功能障礙,特別是發(fā)生于頭頸部者可造成面容畸形、器官移位和功能障礙,目前已成為困擾整形外科臨床治療中日益突出的問(wèn)題,因此對(duì)尋求病理性瘢痕的治療方法迫在眉睫。病理性瘢痕的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,細(xì)胞因子、膠原代謝、基因表達(dá)和細(xì)胞的增殖凋亡等均成為學(xué)者們對(duì)病理性瘢痕發(fā)生機(jī)制的研究熱

2、點(diǎn),但其發(fā)病機(jī)制并不能由單一因素解釋而是多種因素共同作用的結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究TGF-β1和β-catenin基因在病理性瘢痕中的表達(dá)情況,探討TGF-β/Smad信號(hào)通路與Wnt/β-catenin信號(hào)通路在病理性瘢痕發(fā)病機(jī)制中的作用及相互關(guān)系,為臨床對(duì)瘢痕的預(yù)防和治療提供新線索。
　　 方法：
　　 隨機(jī)選取瘢痕疙瘩患者22例為A組,增生性瘢痕患者29例為B組,同時(shí)選取其他整形美容手術(shù)患者切除的正常皮膚組織18例,作

3、為對(duì)照C組。取200mg組織剪碎,加入Trizol充分混勻,室溫靜置;分別加入氯仿、異丙醇,12000rpm離心,棄上清后加入預(yù)冷的乙醇,離心棄上清,室溫干燥5min,將沉淀溶于20μL DEPC水中。紫外分光光度計(jì)測(cè)定A260/A280比值確定RNA濃度。采用10μL逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系,反應(yīng)時(shí)間50min;取cDNA1μL加入設(shè)計(jì)好的引物及試劑盒藥品后,94℃預(yù)變性5min,94℃變性30s,56℃45s,72℃1min;PCR擴(kuò)增35個(gè)

4、循環(huán),72℃充分延伸10min,4℃保存。取PCR產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳后,凝膠成像系統(tǒng)攝像,軟件分析各條帶與內(nèi)參條帶灰度值,其比值表示TGF-β1、β-catenin mRNA轉(zhuǎn)錄水平。應(yīng)用spss12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各組結(jié)果均表示為均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s),各組資料間采用單因素方差分析和SNK檢驗(yàn),P＜0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 TGF-β1mRNA在A、B組中呈高表達(dá),與C組比較,差異有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義(P＜0.01),但A、B兩組之間比較,無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 β-catenin mRNA在A、B組中呈高表達(dá),與C組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),但A、B兩組之間比較,無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 一、TGF-β1基因表達(dá)增高是病理性瘢痕等纖維化疾病的重要機(jī)制之一,即TGF-β/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)病理性瘢痕的形成起到重要作用。
　　 二、