大鼠肺組織血管內(nèi)皮生長因子及內(nèi)皮抑素的表達(dá)變化與肺發(fā)育的關(guān)系.pdf

1、[目的]
　　 肺泡和微血管的充分發(fā)育,使有氧呼吸過程中氣體交換得以順利進(jìn)行,是肺發(fā)育的兩個重要方面。血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)是血管生成促進(jìn)因子,而血管內(nèi)皮抑素(Endostmin,ES)是一種特異的血管內(nèi)皮生長抑制因子。本研究擬以SD大鼠為研究對象,觀察不同時問點胎鼠及新生大鼠肺組織的形態(tài)學(xué)變化,同時檢測肺組織中VEGF及ES表達(dá),旨在探討肺組織中ES的

2、表達(dá)變化與肺發(fā)育的關(guān)系以及ES與VEGF的相關(guān)關(guān)系,為下一步研究ES與早產(chǎn)兒肺疾病關(guān)系提供試驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
　　 [方法]
　　 1.制備早產(chǎn)大鼠模型,于大鼠肺發(fā)育不同階段即胚胎18天(GA18)、胚胎20天(GA20)、胚胎21天(GA21)及生后1天(P1)、4天(P4)、7天(P7)、14天(P14)及21(P21)天留取肺標(biāo)本。
　　 2.顯微鏡下觀察大鼠肺組織的形態(tài)學(xué)變化。
　　 3.采用q

3、RT-PCR檢測肺組織中VEGF及ES mRNA的表達(dá)。
　　 4.采用Western blot檢測腫組織中VEGF及ES蛋白的表達(dá)。
　　 [結(jié)果]
　　 1.肺組織形態(tài)學(xué)變化:GA18肺發(fā)育處于假腺體期;GA20處于小管期;GA21及P1處于囊泡期;出生4天后處于肺泡期。
　　 2.qRT-PCR檢測:大鼠肺發(fā)育過程中,生后肺組織VEGF mRNA表達(dá)水平較GA18明顯增高,P21表達(dá)量最高;而ES

4、mRNA表達(dá)水平出生前最低,P1～P4表達(dá)量逐漸增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);GA20～P14,VEGF mRNA呈持續(xù)穩(wěn)定表達(dá);P4～P21,ES mRNA持續(xù)在較穩(wěn)定水平,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.Western blot檢測:大鼠肺發(fā)育過程中,GA18～GA20VEGF及ES蛋白呈持續(xù)穩(wěn)定表達(dá),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);VEGF蛋白表達(dá)量于GA21最低,而后逐漸升高,于P21達(dá)到最高水

5、平;ES蛋白表達(dá)量于GA21最高,生后表達(dá)量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);P4～P21,ES蛋白表達(dá)持續(xù)在一較穩(wěn)定的水平,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4.VEGF與ES的相關(guān)關(guān)系:在大鼠肺發(fā)育過程中,VEGF及ES在mRNA及蛋白表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。在mRNA表達(dá)水平,VEGF/ES比值出生前逐漸增高,生后逐漸降低,于生后7天呈增高趨勢;在蛋白表達(dá)水平,VEGF/ES比值出生前最低,生后呈逐漸上升趨勢。