MBL基因多態(tài)性與嬰幼兒呼吸道感染疾病的相關性研究.pdf

1、通過測定不同組別研究對象的甘露聚糖結合凝集素(MBL)的血漿水平及其基因第1外顯子第52、54、57位密碼子的堿基序列，了解甘露聚糖結合凝集素基因多態(tài)性的分布情況。并通過比較不同組別研究對象的甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率以及血漿水平，探討甘露聚糖結合凝集素GTC等位基因與嬰幼兒呼吸道感染疾病的相關性，及其血漿水平與GTC等位基因的相關關系。從而加深對甘露聚糖結合凝集素免疫功能的了解，以及毛細支氣管炎、急性上呼吸道感

2、染、反復呼吸道感染等呼吸道疾病的發(fā)病機制的了解，更好地防治嬰幼兒呼吸道感染性疾病，促進兒童的心身健康。
　　 二研究對象、內容與方法:
　　 (一)研究對象
　　 1.毛細支氣管炎組
　　 50例2005年至2006年在我院住院治療的毛細支氣管炎患兒，年齡6個月至2歲，其中男孩27例，女孩23例，均為漢族，符合診斷標準，無嚴重合并癥，排除合并反復呼吸道感染者。
　　 2.反復呼吸道感染組
　

3、　 50例2005年至2006年在本院就診的反復呼吸道感染患兒，其中男孩24例，女孩26例，年齡6個月至2歲，均為漢族，符合診斷標準，無嚴重合并癥，排除曾患毛細支氣管炎者，或有哮喘家族史者。
　　 3.急性上呼吸道感染組
　　 50例2005年至2006年在本院就診的急性上呼吸道感染患兒，年齡6個月至2歲，其中男孩28例，女孩22例，均為漢族，符合診斷標準，無嚴重合并癥，排除曾患毛細支氣管炎者或合并反復呼吸道感染者，或

4、有哮喘家族史者。
　　 4.健康對照組
　　 50例2005年至2006年在深圳市婦幼保健院體檢的健康嬰幼兒，年齡6個月至2歲，其中男孩25例，女孩25例，均為漢族，排除曾患毛細支氣管炎者、反復呼吸道感染者，或有哮喘家族史者。
　　 (二)研究內容、方法
　　 1研究內容
　　 (1)檢測以上四組研究對象的甘露聚糖結合凝集素血漿水平及其基因第1外顯子第52、54、57位密碼子的堿基序列。
　

5、　 (2)比較以上四組研究對象的甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率及血漿水平。
　　 (3)研究甘露聚糖結合凝集素血漿水平與其第54位密碼子GTC等位基因的相關關系。
　　 (4)研究甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因與以上三種嬰幼兒呼吸道感染疾病的關聯(lián)強度。
　　 2研究方法
　　 (1)應用ELISA法定量檢測各組研究對象的甘露聚糖結合凝集素的血漿水平(ng/ml)。

6、r>　　 (2)用聚合酶鏈反應、DNA序列測定法分析各組研究對象的甘露聚糖結合凝集素基因第1外顯子第52、54、57位密碼子的堿基序列。
　　 3統(tǒng)計學處理
　　 計量資料(甘露聚糖結合凝集素的血漿水平)的描述用均數(shù)±標準差(-x±s)表示。多組樣本均數(shù)比較采用方差分析，統(tǒng)計分析前先進行方差齊性檢驗。計數(shù)資料(甘露聚糖結合凝集素GTC等位基因頻率)的比較用X2檢驗，先計算出各組研究對象的甘露聚糖結合凝集素基因型頻率和等

7、位基因頻率，然后經Hardy-Weinburg遺傳平衡定律檢驗，表明各基因型頻率已達遺傳平衡，具有群體代表性，再采用卡方檢驗進行各組間構成比差異的比較。各種疾病與甘露聚糖結合凝集素54位密碼子GTC等位基因的關聯(lián)強度以比值比(OR)代表，OR值95％置信區(qū)間(CI)的計算采用WOOLF法。甘露聚糖結合凝集素的血漿水平與其GTC等位基因的相關性分析用等級資料相關分析。所有數(shù)據(jù)均用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理，檢驗標準為P<0.05有統(tǒng)計學

8、意義。
　　 三結果:
　　 1.反復呼吸道感染組的甘露聚糖結合凝集素血漿水平較毛細支氣管炎組、急性上呼吸道感染組、健康對照組3組研究對象降低，有統(tǒng)計學意義的差別。毛細支氣管炎組、急性上呼吸道感染組、健康對照組3組兩兩比較甘露聚糖結合凝集素血漿水平，均無統(tǒng)計學意義的差別。
　　 2.甘露聚糖結合凝集素第一外顯子第54位密碼子GTC等位基因頻率約為0.16，存在基因多態(tài)性，未見52和57位密碼子的點突變。
　

9、　 3.反復呼吸道感染組的甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率較健康對照組增高，有統(tǒng)計學意義的差別。毛細支氣管炎組及急性上呼吸道感染組的甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率較健康對照組無統(tǒng)計學意義的差別。
　　 4.甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因頻率與反復呼吸道感染正關聯(lián)。[OR=2.19，95％CI為1.03～4.65，P<0.05]。
　　 5.甘露聚糖結合凝集素第54位

10、密碼子GTC等位基因與其血漿水平呈負相關：r=-0.73。
　　 四結論:
　　 1.漢族嬰幼兒甘露聚糖結合凝集素第一外顯子第54位密碼子存在基因多態(tài)性，GTC等位基因頻率約為0.16，未見52、57位密碼子點突變。
　　 2.甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因與其血漿水平負相關。
　　 3.反復呼吸道感染組與健康對照組比較，其MBL第54位密碼子GTC等位基因頻率增高，MBL血漿水平降低，均

11、有統(tǒng)計意義差別。
　　 4.甘露聚糖結合凝集素第54位密碼子GTC等位基因與嬰幼兒反復呼吸道感染的易感性相關。
　　 五進一步研究的設想:
　　 (一)本研究的局限
　　 1.未與其它臨床檢驗結果如：血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、C反應蛋白等數(shù)據(jù)相結合，進一步深入全面的進行分析。
　　 2.所有呼吸道感染病例均取于一家醫(yī)院，不能完全排除病人根據(jù)病情嚴重程度選擇不同的醫(yī)院，從而出現(xiàn)研究對象偏

12、倚。
　　 3.缺少呼吸道感染疾病組靜止期的甘露聚糖結合凝集素血漿水平的對比。
　　 (二)進一步研究的設想
　　 1.與其它臨床檢驗結果如：血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM、C反應蛋白等數(shù)據(jù)相結合，進一步深入全面的進行分析。
　　 2.研究對象從多家醫(yī)院收集，盡量減少研究對象偏倚。
　　 3.研究對象增加腸道感染組，由此可以比較甘露聚糖結合凝集素血漿水平在不同系統(tǒng)感染的急性期是否具有不同程度