PD-1基因多態(tài)性與嬰幼兒巨細(xì)胞病毒感染的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：本研究通過檢測人巨細(xì)胞病毒(HCMV)感染患兒程序性細(xì)胞死亡分子-1基因多態(tài)性及外周血CD4+T淋巴細(xì)胞表面PD-1分子的表達，探討PD-1基因多態(tài)性及表達水平與嬰幼兒巨細(xì)胞病毒感染的相關(guān)性，為進一步深入研究PD-1基因與嬰幼兒巨細(xì)胞病毒感染的關(guān)系提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)合限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性分析技術(shù)(PCR-RFLP)，對151例巨細(xì)胞病毒感染患兒及132例正常對照兒童進行了PD-1

2、.3、PD-1.5、PD-1.9基因多態(tài)性檢測；采用流式細(xì)胞術(shù)對其中30例巨細(xì)胞病毒感染肝炎患兒及32例正常對照兒童檢測了外周血CD4+T淋巴細(xì)胞表面PD-1分子的表達。應(yīng)用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理，分析PD-1多態(tài)性基因型分布頻率及表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.根據(jù)Hardy-Weinberg平衡x2檢驗，HCMV感染組與正常對照組PD-1.5、PD-1.9多態(tài)性基因型分布頻率均符合遺傳學(xué)的Hardy-Wei

3、nberg平衡定律。PD-1.3位點在兩組人群中只檢測到GG基因型和G等位基因。
　　2.HCMV感染組PD-1.5多態(tài)性CC、CT、TT基因型分布頻率分別為60.9％、33.1%、6.0%，正常對照組分別為43.9%、49.3%、6.8%，兩組基因型分布頻率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=8.426，P=0.015)。其中兩組間CC基因型和非CC基因型(包括CT和TT)的分布頻率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=8.160，P=0.004)；兩組

4、間CT基因型和非CT基因型(包括CC和TT)的分布頻率差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=7.596，P=0.006)；兩組間TT基因型和非TT基因型(包括CC和CT)的分布頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.087，P=0.768)。
　　3.HCMV感染組PD-1.9多態(tài)性TT、CT、CC基因型分布頻率分別為28.5%、45.0%、26.5%，正常對照組分別為21.2%、48.5%、30.3%，兩組基因型分布頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=2.

5、024，P=0.364)。其中兩組間TT基因型和非TT基因型(包括CT和TT)的分布頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=1.978，P=0.160)；兩組間CT基因型和非CT基因型(包CC和TT)的分布頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.337，P=0.561)；兩組間CC基因型和非CC基因型(包括CC和CT)的分布頻率差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義(X2=0.505，P=0.477)。
　　4.HCMV感染組PD-1.5C等位基因和T等位基因的分布頻率

6、分別為77.5%、22.5%，對照組分別為68.6%、31.4%，兩組等位基因分布頻率差異有統(tǒng)學(xué)意義(X2=5.733，P=0.017，其中的c等位基因OR值為：1.578，95%CI：1.085-2.295；T等位基因的OR值為：0.641，95%CI：0.441-0.932)。HCMV感染組PD-1.9T等位基因和C等位基因的分布頻率分別為51.0%，49.0%，對照組分別為45.5%、54.5%，兩組等位基因分布頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意

7、義(X2=1.730，P=0.188，其中T等位基因的OR值為：1.249，95%CI：0.897-1.739；C等位基因的OR值為：0.801，95%CI：0.575-1.115)。
　　5.HCMV肝炎組外周血CD4+T細(xì)胞表達率(26.44±7.59%)低于正常對照組(30.52±7.18%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.19，P=0.032)；HCMV肝炎組CD4+T細(xì)胞表面PD-1表達率(6.93±4.59%)高于正常對照

8、組(4.17±1.92%)，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.06，P=0.004)。HCMV肝炎組外周血CD4+T細(xì)胞表達率(%)與CD4+T細(xì)胞表面PD-1表達率(%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.600，P<0.01)，正常對照組中兩者無明顯相關(guān)性(r=-0.180，P=0.919)。
　　結(jié)論：
　　1.PD-1.3位點未檢測到A等位基因，因此不再進行疾病的相關(guān)性分析。
　　2.PD-1.5位點多態(tài)性與嬰幼兒HCMV感染的發(fā)

9、生有關(guān)聯(lián)，其中攜帶CC基因型及C等位基因兒童可能更易發(fā)生HCMV感染。
　　3.PD-1.9位點基因型分布頻率及等位基因分布頻率在HCMV感染組與對照組間均無顯著性差異，提示PD-1.9位點多態(tài)性與嬰幼兒HCMV感染的易感性可能無關(guān)聯(lián)。
　　4.HCMV肝炎組CD4+T細(xì)胞表達水平低于正常對照組，提示HCMV肝炎患兒存在細(xì)胞免疫功能低下：HCMV肝炎組CD4+T細(xì)胞表面PD-1表達水平明顯高于正常對照組，提示PD-1可能參與