Pin1與cyclin D1在急性白血病中的表達(dá)及意義.pdf

1、腫瘤發(fā)生的共同特征是細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制的紊亂,導(dǎo)致細(xì)胞的生長(zhǎng)失控.急性白血病是造血細(xì)胞惡性克隆性疾病,其顯著特征是細(xì)胞過(guò)度增殖和分化障礙,多種癌基因、抑癌基因及其相關(guān)基因功能異常,引起其相應(yīng)蛋白的變化,導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)控紊亂,細(xì)胞惡性增殖,促進(jìn)了白血病的發(fā)生發(fā)展.細(xì)胞周期的運(yùn)行要實(shí)現(xiàn)精確調(diào)控,適時(shí)的蛋白結(jié)構(gòu)磷酸化或脫磷酸化的改變與特定蛋白的降解一樣重要. 細(xì)胞中磷酸化調(diào)節(jié)是一種普遍存在的生物現(xiàn)象,細(xì)胞內(nèi)的很多蛋白通過(guò)磷酸化或脫磷酸化來(lái)活化從

2、而參與細(xì)胞功能的調(diào)節(jié).磷酸化依賴(lài)的脯氨酸異構(gòu)酶是磷酸化調(diào)節(jié)中很重要的調(diào)控機(jī)制.目前的研究認(rèn)為,磷酸化絲/蘇氨酸.脯氨酸殘基存在順式和反式兩種構(gòu)象,而Pin1則通過(guò)與磷酸化的絲/蘇氨酸.脯氨酸殘基結(jié)合后,使其構(gòu)像發(fā)生改變,由順式變?yōu)榉词?調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能.Pin1的過(guò)表達(dá)可能參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展. Cyclin D1是G1/S轉(zhuǎn)換的限速控制因素,抑制cyclin D1的活性,可以使細(xì)胞受阻于G1期,限制瘤細(xì)胞的增殖,從而抑制腫

3、瘤生長(zhǎng).研究發(fā)現(xiàn),cyclin D1在多種腫瘤中過(guò)表達(dá). 本研究采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)Pin1與cyclin D1蛋白在初治急性白血病患者及完全緩解后患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)情況及它們之間的相關(guān)性,探討其在急性白血病發(fā)病中的作用.1.研究對(duì)象:(1)初治急性白血病骨髓:共收集標(biāo)本62例,其中男42例,女20例,年齡10～75歲(中位年齡35歲).包括:①急性髓系白血病(AML)40例,其中M<,0>2例,M<,1> 2例,M<

4、,2> 20例,M<,3> 7例,M<,4> 3例,M<,5> 3例,M<,6> 2例,M<,7>1例;②急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)22例.所有急性白血病患者均依據(jù)FAB分型診斷標(biāo)準(zhǔn)劃分.(2)完全緩解病人骨髓35例,為初治組完全緩解后標(biāo)本.(3)對(duì)照組為非惡性血液病骨髓正常者.所有研究對(duì)象均取自于2006年5月至12月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診患者. 2.標(biāo)本處理:采集急性白血病患者化療前骨髓和對(duì)照者骨髓各1ml,分離單個(gè)核細(xì)

5、胞,制備細(xì)胞滴片,采用免疫細(xì)胞化學(xué)法染色檢測(cè)Pinl和cyclin D1蛋白在初治AL(Acute leukemia)、AL-CR及正常對(duì)照者骨髓細(xì)胞中的表達(dá). 3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì):實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,Pin1蛋白、cyclin D1抗原陽(yáng)性率比較采用X<'2>檢驗(yàn),變量間的相關(guān)分析應(yīng)用Spearman等級(jí)相關(guān)分析,以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn). 結(jié)果 1.Pin1在正常人骨髓標(biāo)本中不表達(dá)或呈微弱

6、表達(dá).在初治AL患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中59.7﹪呈現(xiàn)胞核或胞漿的陽(yáng)性和(或)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),其中.AML陽(yáng)性率為65﹪,ALL陽(yáng)性率為50﹪,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).在AL-CR中陽(yáng)性率為2.9﹪,其中AML-CR陽(yáng)性率為4.2﹪,ALL-CR陽(yáng)性率為0﹪,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).初治組與正常對(duì)照組,初治組與AL-CR組間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),AL-CR組與對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),且初治A

7、ML與AML-CR間及ALL與ALL-CR間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05). 2.cyclin D1在正常人骨髓標(biāo)本中不表達(dá)或微弱表達(dá).在初治AL患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中56.5﹪呈現(xiàn)胞核或胞漿的陽(yáng)性和(或)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),以胞核表達(dá)為主,其中AML的陽(yáng)性率為50﹪,ALL的陽(yáng)性率為68﹪,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).在AL-CR中陽(yáng)性率為2.9﹪,其中AML-CR陽(yáng)性率為0﹪,ALL-CR陽(yáng)性率為9.1﹪,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意

8、義(P>0.05).初治組與正常對(duì)照組,初治組與AL-CR組間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),AL-CR組與對(duì)照組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),且初治AML與AML-CR間及ALL與ALL-CR間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05). 3.相關(guān)性分析顯示Pinl和cyclin D1在急性白血病患者骨髓中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.465,P<0.05). 4.Pinl和cyclin D1蛋白水平與患者的年齡、性別、白細(xì)胞高低及