Pin1與cyclin D1在急性白血病中的表達及意義.pdf

1、腫瘤發(fā)生的共同特征是細胞周期調(diào)控機制的紊亂,導(dǎo)致細胞的生長失控.急性白血病是造血細胞惡性克隆性疾病,其顯著特征是細胞過度增殖和分化障礙,多種癌基因、抑癌基因及其相關(guān)基因功能異常,引起其相應(yīng)蛋白的變化,導(dǎo)致細胞周期調(diào)控紊亂,細胞惡性增殖,促進了白血病的發(fā)生發(fā)展.細胞周期的運行要實現(xiàn)精確調(diào)控,適時的蛋白結(jié)構(gòu)磷酸化或脫磷酸化的改變與特定蛋白的降解一樣重要. 細胞中磷酸化調(diào)節(jié)是一種普遍存在的生物現(xiàn)象,細胞內(nèi)的很多蛋白通過磷酸化或脫磷酸化來活化從

2、而參與細胞功能的調(diào)節(jié).磷酸化依賴的脯氨酸異構(gòu)酶是磷酸化調(diào)節(jié)中很重要的調(diào)控機制.目前的研究認為,磷酸化絲/蘇氨酸.脯氨酸殘基存在順式和反式兩種構(gòu)象,而Pin1則通過與磷酸化的絲/蘇氨酸.脯氨酸殘基結(jié)合后,使其構(gòu)像發(fā)生改變,由順式變?yōu)榉词?調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能.Pin1的過表達可能參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展. Cyclin D1是G1/S轉(zhuǎn)換的限速控制因素,抑制cyclin D1的活性,可以使細胞受阻于G1期,限制瘤細胞的增殖,從而抑制腫

3、瘤生長.研究發(fā)現(xiàn),cyclin D1在多種腫瘤中過表達. 本研究采用免疫細胞化學(xué)法檢測Pin1與cyclin D1蛋白在初治急性白血病患者及完全緩解后患者骨髓單個核細胞中的表達情況及它們之間的相關(guān)性,探討其在急性白血病發(fā)病中的作用.1.研究對象:(1)初治急性白血病骨髓:共收集標本62例,其中男42例,女20例,年齡10～75歲(中位年齡35歲).包括:①急性髓系白血病(AML)40例,其中M<,0>2例,M<,1> 2例,M<

4、,2> 20例,M<,3> 7例,M<,4> 3例,M<,5> 3例,M<,6> 2例,M<,7>1例;②急性淋巴細胞白血病(ALL)22例.所有急性白血病患者均依據(jù)FAB分型診斷標準劃分.(2)完全緩解病人骨髓35例,為初治組完全緩解后標本.(3)對照組為非惡性血液病骨髓正常者.所有研究對象均取自于2006年5月至12月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診患者. 2.標本處理:采集急性白血病患者化療前骨髓和對照者骨髓各1ml,分離單個核細

5、胞,制備細胞滴片,采用免疫細胞化學(xué)法染色檢測Pinl和cyclin D1蛋白在初治AL(Acute leukemia)、AL-CR及正常對照者骨髓細胞中的表達. 3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計:實驗數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理,Pin1蛋白、cyclin D1抗原陽性率比較采用X<'2>檢驗,變量間的相關(guān)分析應(yīng)用Spearman等級相關(guān)分析,以α=0.05為檢驗水準. 結(jié)果 1.Pin1在正常人骨髓標本中不表達或呈微弱

6、表達.在初治AL患者骨髓單個核細胞中59.7﹪呈現(xiàn)胞核或胞漿的陽性和(或)強陽性表達,其中.AML陽性率為65﹪,ALL陽性率為50﹪,兩者之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05).在AL-CR中陽性率為2.9﹪,其中AML-CR陽性率為4.2﹪,ALL-CR陽性率為0﹪,兩者之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05).初治組與正常對照組,初治組與AL-CR組間有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),AL-CR組與對照組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),且初治A

7、ML與AML-CR間及ALL與ALL-CR間均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05). 2.cyclin D1在正常人骨髓標本中不表達或微弱表達.在初治AL患者骨髓單個核細胞中56.5﹪呈現(xiàn)胞核或胞漿的陽性和(或)強陽性表達,以胞核表達為主,其中AML的陽性率為50﹪,ALL的陽性率為68﹪,兩者之間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05).在AL-CR中陽性率為2.9﹪,其中AML-CR陽性率為0﹪,ALL-CR陽性率為9.1﹪,兩者之間無統(tǒng)計學(xué)意

8、義(P>0.05).初治組與正常對照組,初治組與AL-CR組間有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),AL-CR組與對照組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),且初治AML與AML-CR間及ALL與ALL-CR間均有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05). 3.相關(guān)性分析顯示Pinl和cyclin D1在急性白血病患者骨髓中的表達呈正相關(guān)(r=0.465,P<0.05). 4.Pinl和cyclin D1蛋白水平與患者的年齡、性別、白細胞高低及