系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者干細胞因子及其受體的意義研究.pdf

1、研究目的: 通過檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者血清干細胞因子(SCF)及外周血單個核細胞c-kit水平，并與正常對照組比較，研究SCF及其受體c-kit在SLE患者中是否存在異常，這種異常是否與SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)、貧血程度等相關(guān)，并探討SCF/c-kit在SLE發(fā)病機制中可能的作用。 研究背景: 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)是一種常見的自身免

2、疫性疾病，其疾病特點是機體免疫系統(tǒng)平衡失調(diào)后對自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，并造成多系統(tǒng)的組織損傷。 以往已有國內(nèi)外專家學(xué)者針對SLE的免疫學(xué)異常，研究了TNF-α、TGF-β、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12等細胞因子與SLE的關(guān)系<'[1,2,3,4]>。本實驗針對以前的研究較少涉及的SCF及其受體進行研究，探討SCF/c-kit在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中的表達與正常人群的差異，及其與SLE的臨床表現(xiàn)的相關(guān)性。

3、 干細胞因子(SCF)是由骨髓微環(huán)境中的基質(zhì)細胞產(chǎn)生的多種調(diào)節(jié)因子中重要的一員。c-kit作為SCF的受體廣泛存在于體內(nèi)多種細胞膜中，包括外周血單個核細胞(PBMC)、肥大細胞、肝細胞等。c-kit蛋白的變化影響著SCF與其結(jié)合水平及細胞功能。SCF與c-kit受體結(jié)合，引起受體的二聚體化及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，在造血、免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要功能。SCF及其受體結(jié)合后除調(diào)控造血干/祖細胞增生、分化、自我更新外，還可作用于淋巴細胞、樹突狀細胞(DC)

4、、肥大細胞等<'[5]>。SCF及其受體結(jié)合后可能通過直接刺激淋巴細胞增生、刺激DC對淋巴細胞的激活及促進肥大細胞參與器官纖維化的形成等環(huán)節(jié)，而直接或間接的參與了SLE疾病的發(fā)生、發(fā)展<'[6,7]>。對于SLE患者的SCF及其受體c-kit蛋白的研究目前國內(nèi)外僅有個別報道。國內(nèi)綜合研究SCF及其受體c-kit蛋白兩者在SLE患者外周血中的表達及與臨床的關(guān)聯(lián)和分析尚未見報道。本課題計劃用ELISA法檢測SLE患者血清的SCF，同時以流式

5、細胞儀來檢測SLE患者外周血單個核細胞的c-kit蛋白的表達率，結(jié)合上述兩組數(shù)據(jù)和患者臨床表現(xiàn)，綜合分析SCF及其受體的水平與病情嚴重程度(SLEDAI)及Hb、補體、血沉等的相關(guān)性。 材料與方法: 1．研究對象及分組 選擇我院門診及住院的SLE確診患者，分為SLE活動組、SLE非活動組；并以志愿獻血的健康人作為對照組。所有SLE患者均符合美國風濕病協(xié)會(ARA)1982年修訂的SLE診斷標準。所有SLE患者的疾

6、病活動性按Bomberdier等<'[8]>制定的SLE活動指數(shù)(SLEDAI)判斷，活動期(SLEDAI≥8分)，非活動期(SLEDAI<8分)<'[9]>。 2．實驗方法 (1) 取符合條件的患者及健康獻血者外周靜脈血3ml，于6小時內(nèi)分離血清，-20℃凍存待用。用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測上述血清的SCF水平。 (2) 取肝素抗凝靜脈血2ml，離心分離單個核細胞(PBMC)，以流式細胞儀檢測外

7、周血PBMC的c-kit受體蛋白表達率。 (3) 同時測定SLE患者的血沉、補體C<,3>、Hb等。 3．統(tǒng)計方法 實驗數(shù)據(jù)以Means±SD表示，組間均值比較采用t檢驗，兩組間關(guān)系采用相關(guān)分析。以上均采用SPSS 12統(tǒng)計軟件包完成。 結(jié)果: 1．SLE非活動組患者血清SCF水平顯著高于正常對照組并有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；SLE活動組SCF水平升高更明顯，與SLE非活動組、正常對照組比較均

8、有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 2．SLE活動組外周血單個核細胞(PBMC)的c-kit受體蛋白表達率顯著高于SLE非活動組及正常對照組，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)；但SLE非活動組與正常對照組比較沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.43)。 3．SLE患者中血清SCF水平與SLEDAI呈正相關(guān)(r=0.29，P<0.05)，與血沉呈正相關(guān)(r=0.53，P<0.05)，與C<,3>呈負相關(guān)(r=-0.45，P<0.05

9、)； SLE患者外周血單個核細胞的c-kit受體蛋白表達率與SLEDAI呈正相關(guān)(r=0.81，P<0.05)，與血沉無明顯相關(guān)相關(guān)(P=0.17)，與C<,3>呈負相關(guān)(r=-0.33，P<0.05)。 4．活動期SLE組血清SCF及PBMC c-kit水平與血紅蛋白濃度均呈負相關(guān)(r=-0.39，P<0.05/r=-0.48，P<0.05)。 結(jié)論: 1．SLE患者血清SCF處于高水平，且其水平與SLEDAI