有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽OATP1B1的遺傳藥理學(xué)研究.pdf

1、遺傳藥理學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)藥物代謝酶、藥物受體和轉(zhuǎn)運(yùn)體的遺傳多態(tài)性是藥物反應(yīng)個(gè)體差異的決定因素。雖然關(guān)于肝臟藥物代謝酶(包括I相氧化酶和羥化酶等，II相葡萄糖醛酸化酶、硫酸化酶、乙酰化酶等)的基因多態(tài)性和藥物的代謝和效應(yīng)已經(jīng)有了較多研究，但是一直以來關(guān)于肝臟或腎臟等器官的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的遺傳多態(tài)性在藥物處置中所起的作用尚知之甚少。 有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽OATP1B1(又稱OATP=c，OATP2，LSTl，編碼基因SLCO1B1)是一種特異性

2、分布于肝細(xì)胞基底膜上的一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，和體內(nèi)諸多內(nèi)源性或外源性物質(zhì)的肝臟攝取作用關(guān)系密切。例如膽汁酸，硫化和葡萄糖醛酸化結(jié)合物，甲狀腺激素，多肽，甲氨喋呤和他汀類藥物，包括普伐他汀、匹伐他汀、羅素他汀和西伐他汀等都是OATPlBl轉(zhuǎn)運(yùn)的底物。近年來，OATPlBl基因上已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多個(gè)單核苷酸多態(tài)性(SNP)，其中有些SNP已經(jīng)在體外或體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中證實(shí)與轉(zhuǎn)運(yùn)功能異常有關(guān)。Tirona等首先在OATPIBI轉(zhuǎn)染的Hela細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)T217C(O

3、ATP1B1*2)、T521C(OATPlBI*5)、T1058C(OATPlBl*6)、G1463C(OATPlBl*9)和A1964G(OATPIBl*10)突變導(dǎo)致細(xì)胞對OATPlBl底物的攝取能力大大降低，這些突變體的轉(zhuǎn)運(yùn)活性僅為野生型的7％～53％。接著Sugivama等的實(shí)驗(yàn)室在人體試驗(yàn)中證實(shí)了SLCO1B1 521T>C基因突變導(dǎo)致他汀類降脂藥普伐他汀的非腎清除率降低，血藥濃度增高，并且報(bào)道了521T>C在日本人群中的發(fā)生

4、頻率約15.8％，提示在東方人群(如中國人群)中可能存在相近的發(fā)生率。 鑒于OATPlBl在介導(dǎo)生理功能和藥理效應(yīng)中的重要作用，對OATPlBl多態(tài)性的研究將有助于為藥物反應(yīng)個(gè)體差異提供分子水平的解釋，同時(shí)也為臨床合理用藥提供指導(dǎo)。本課題立項(xiàng)時(shí)關(guān)于OArPlBl基因多態(tài)性的功能研究剛剛開始進(jìn)入體內(nèi)研究階段，整體情況下該轉(zhuǎn)運(yùn)體遺傳多態(tài)性與對藥物處置、治療效果的影響尚屬未知。同時(shí)，對于存在地區(qū)和種族差異的OATPlBl遺傳多態(tài)性在占

5、世界人口四分之一的中國人群中的分布特征，也有待查明。 基于以上研究背景，本課題旨在查明OATPIBl常見遺傳多態(tài)性在中國健康人群中的分布特征。通過嚴(yán)格設(shè)計(jì)的l臨床實(shí)驗(yàn)，在整體藥代動力學(xué)水平和藥物相互作用層面探討OATPlBl遺傳多態(tài)性對轉(zhuǎn)運(yùn)體功能的影響；并進(jìn)一步在冠心病伴高膽固醇血癥病人中，以普伐他汀為模型藥，研究OATPlBl遺傳多態(tài)性對對其藥效學(xué)方面的影響，為藥物反應(yīng)個(gè)體差異提供分子水平的解釋，并為臨床實(shí)施基因?qū)蛐詡€(gè)體化用

6、藥提供指導(dǎo)。 本課題的主要研究結(jié)果如下： 1.查明了中國男性漢族人群中SLCOIBl 388G>A和521T>C突變等位基因的發(fā)生頻率。在111名中國漢族健康人群中，SLCOIBl的388G>A和521T>C突變等位基因的發(fā)生頻率分別為73.4％和14.0％。單倍型分析顯示中國人中主要單倍型為SLCO1Bl<'*>la，SLCOIBl<'*>lb和SLCOIBl<'*>15三種。 2.證實(shí)SLCO1Bl 521T

7、>C基因多態(tài)性是影響血漿基礎(chǔ)膽紅素水平的一個(gè)重要因素。SLCO1B1 521T>C突變攜帶者較野生型純合子而言血漿非結(jié)合型膽紅素、總膽紅素、結(jié)合型膽紅素水平較高。SLCOIBl 521CC突變純合子個(gè)體患高膽紅素血癥的風(fēng)險(xiǎn)更大。血漿膽紅素水平可為小劑量利福平所升高，但是升高的程度與SLCO181521T>C基因多態(tài)性之間沒有相關(guān)性。 3.首次發(fā)現(xiàn)OATPlBl參與短效降糖藥那格列奈的肝轉(zhuǎn)運(yùn)過程，OATP1Bl可能 是介導(dǎo)那格列

8、奈攝取進(jìn)入肝臟的關(guān)鍵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白；并證實(shí)在SLCOlB1 521T>c 基因突變的個(gè)體中那格列奈的平均血漿藥物濃度顯著高于野生型個(gè)體。對于服 用那格列奈、瑞格列奈這一類藥物的病人進(jìn)行SLCOlBl基因型檢測可能對于 獲得更好療效以及避免不良反應(yīng)等方面有幫助。 4.我們研究了SLCO1B1 52lT>C基因多態(tài)性和普伐他汀降脂療效之間的關(guān)系。 發(fā)現(xiàn)經(jīng)過普伐他汀20mg治療30天后，SLCOlBl 521T>C基因多態(tài)性與普伐

9、 他汀的降脂療效呈現(xiàn)相關(guān)性，521T>C突變攜帶者較野生型純合子降低總膽固 醇作用顯著減弱。低密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯降低的效果及高密度脂蛋白 升高的效果在兩組不同基因型的人群中沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 5.研究了不同SLCOIBl 521T>C基因單倍型個(gè)體中利福平和瞇噠唑倫的藥物相 互作用，發(fā)現(xiàn)咪噠唑倫2.5小時(shí)單點(diǎn)血藥濃度可作為簡單而有效的指標(biāo)用于評 價(jià)CYP3A4活性。咪噠唑倫的血藥濃度在應(yīng)用利福平后顯著降低，但是咪噠

10、唑 倫AUC(O-∞)和C2.5h的變化程度在SLCOlBl不同單倍型間沒有顯著差異。 而且SLCOIBl 52lT>C基因型對利福乎的血藥濃度無顯著影響 。 6.在羅素他汀的藥物相關(guān)蛋白遺傳多態(tài)研究中，我們排除SLCO1Bl和CYP2C9主要突變的作用后，發(fā)現(xiàn)BCRP 421C>A基因多態(tài)性對健康受試者體內(nèi)羅素他汀的藥代動力學(xué)有顯著影響，該突變引起羅素他汀血藥濃度顯著升高?？傊?，本項(xiàng)目從群體、整體到分子水平的研究為那格列奈