移植血管低溫-深低溫保存的實驗研究.pdf

1、前言
　　 近20年來,血管移植在治療血管源性疾病及器官移植的循環(huán)重建中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,臨床上對血管替代物的需求也越來越多,按照來源這些血管替代物可分為3類:自體血管,人造血管和同種異體血管。同種異體血管,在理論上具有結(jié)構(gòu)相同、取材方便、管徑匹配等優(yōu)點,可隨器官供體大量獲取。隨著組織保存技術(shù)的進步,人們對異體血管的使用逐漸增多。
　　 異體血管現(xiàn)有的保存方法有深低溫凍存、低溫冷保存法(0-4℃)和戊二醛保存,前兩種

2、方法較為常用。低溫冷保存法具有簡便易行、設(shè)備和條件要求不高等優(yōu)點,但是其保存時限短,相關(guān)的研究較少；深低溫保存法長期保存效果好,但是操作相對復雜、成本及設(shè)備要求較高。另外,目前尚無統(tǒng)一、公認的標準來判定復溫后血管的活力。在臨床實踐中,由于各種因素,己行4℃保存的移植血管在短期內(nèi)可能仍得不到使用,此時的血管能否再行深低溫保存,從而延長血管的保存時間?本實驗通過觀察低溫及深低溫保存后移植血管的細胞代謝活性及組織結(jié)構(gòu)變化情況,探討4℃ UW液

3、冷保存移植血管的效果及時限,-80℃深低溫保存血管的效果及低溫-深低溫序貫保存移植血管的可行性與安全時限。
　　 目的
　　 通過觀察低溫及深低溫保存后移植血管的細胞代謝活性及組織結(jié)構(gòu)變化情況,探討4℃UW液保存移植血管的效果及時限、-80℃深低溫保存血管的效果及低溫-深低溫序貫保存移植血管的可行性與安全時限。
　　 材料及方法
　　 取人的髂動脈、脾動脈于4℃UW液中保存72小時、1周、2周、3周、4周

4、,得到的血管一部分進行氯化硝基四氮唑藍(NBT)染色,光鏡及透射電鏡觀察。另一部分血管于-80℃冰箱中繼續(xù)保存4周,復溫后行NBT染色、光鏡及電鏡檢查。
　　 結(jié)果
　　 4℃UW液保存2周以內(nèi)的動脈NBT染色時間與新鮮組無統(tǒng)計學差異,4℃UW液保存1周以內(nèi)的動脈再行-80℃保存,其NBT染色時間與新鮮凍存組無統(tǒng)計學差異,4℃保存1周以內(nèi)的血管行-80℃深低溫保存前后的NBT染色時間無統(tǒng)計學差異；隨著4℃低溫保存時間的延