漢防己甲素對(duì)人肺腺癌細(xì)胞的放射增敏作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 臨床上一些腫瘤對(duì)放射治療并不敏感，為提高放療效果人們采用了各種方法。其中化學(xué)藥物的增敏作用是研究的熱點(diǎn)之一。本研究旨在觀察漢防己甲素對(duì)人肺腺癌細(xì)胞的放射敏感性的影響，并初步研究其作用機(jī)制。以明確漢防己甲素對(duì)人肺腺癌細(xì)胞是否有放射增敏作用及其機(jī)理。為臨床應(yīng)用的開展提供一定的理論基礎(chǔ)。 方法： 1、本研究的靶細(xì)胞為體外培養(yǎng)的人肺腺癌SPC-A1細(xì)胞。采用MTT法檢測(cè)漢防己甲素對(duì)SPC-A1細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。將

2、SPC-A1細(xì)胞分為不同濃度漢防己甲素處理組，并設(shè)立陰性對(duì)照組。分別在24h、48h和72h時(shí)檢測(cè)OD值，并據(jù)其計(jì)算出半數(shù)抑制濃度。 2、根據(jù)細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，選擇1μmol/L濃度的漢防己甲素來(lái)進(jìn)行增敏研究。采用MTT法來(lái)比較單純照射4Gy、照射4Gy后進(jìn)行漢防己甲素處理、單用漢防己甲素及對(duì)照組之間OD值的差異和細(xì)胞抑制率的差異。 3、采用克隆形成法來(lái)研究漢防己甲素對(duì)SPC-A1細(xì)胞的放射敏感性的影響。將兩組的數(shù)據(jù)分別

3、采用多靶單擊模型和線性二次方程來(lái)擬合細(xì)胞存活曲線，并計(jì)算放射敏感性參數(shù)D0、Dq、α/β、SF2，以比較漢防己甲素對(duì)SPC-Al細(xì)胞的增敏作用。 4、采用流式細(xì)胞術(shù)來(lái)研究漢防己甲素對(duì)SPC-Al細(xì)胞放射增敏作用的機(jī)制。檢測(cè)不同濃度的漢防己甲素處理組和照射后進(jìn)行漢防己甲素處理組的G2期細(xì)胞數(shù)的比例。以證實(shí)輻射是否會(huì)引起SPC-Al細(xì)胞的G2期阻滯，以及漢防己甲素是否有清除由輻射導(dǎo)致的SPC-Al細(xì)胞的G2期阻滯的作用。 結(jié)

4、果： 1、不同濃度的漢防己甲素作用于人肺腺癌SPC-Al細(xì)胞，在24h、48h及72h時(shí)其細(xì)胞毒作用均呈濃度依賴性。其24h、48h、72h半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為：10.77μmol/L、5.78μmol/L、和3.89μmol/L。 2、MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示照射后加漢防己甲素組的OD值較單純照射組降低(p<0.05)，細(xì)胞抑制率較單純照射組提高(p<0.05)，提示漢防己甲素提高了X射線對(duì)SPC-Al細(xì)胞的殺傷

5、作用。 3、克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示漢防己甲素降低了受到照射后的SPC-Al細(xì)胞的克隆形成率。據(jù)存活分?jǐn)?shù)擬合細(xì)胞存活曲線計(jì)算出的表示放射敏感性的指標(biāo)D0、Dq、α/β、SF2均提示漢防己甲素提高了放射敏感性(p<0.05)。放射增敏比(SER)按多靶單擊模型計(jì)算為1.48，按線性二次方程(L-Q模型)計(jì)算為1.414、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的結(jié)果顯示照射導(dǎo)致了SPC-Al細(xì)胞的G2期阻滯(p<0.01)。加用漢防己甲素后可以清除這種