蟲(chóng)草素對(duì)肺腺癌細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景: 植物性抗腫瘤藥物在腫瘤治療領(lǐng)域占有重要地位。例如紫杉醇、長(zhǎng)春瑞濱及依托泊苷等都是眾所周知的用于肺癌治療的化療藥物。蟲(chóng)草素（Cordycepin）即3'-脫氧腺苷，屬于核酸衍生物，為冬蟲(chóng)夏草和北冬蟲(chóng)夏草的活性成分之一，結(jié)構(gòu)明確，具有調(diào)節(jié)免疫、調(diào)節(jié)血糖、抗炎、抗血管生成及抗腫瘤作用。以往研究表明，蟲(chóng)草素可通過(guò)阻滯細(xì)胞周期及誘導(dǎo)凋亡抑制白血病細(xì)胞等多種腫瘤細(xì)胞的分裂增殖。
　　 目的: 初步探討北冬蟲(chóng)夏草活性成分蟲(chóng)草素抑制小鼠

2、Lewis肺腺癌細(xì)胞（LLC），人肺腺癌細(xì)胞（A549、H460）生長(zhǎng)及聯(lián)合順鉑（DDP）對(duì)肺腺癌細(xì)胞活力的影響。了解蟲(chóng)草素抑制肺腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用相關(guān)機(jī)制，為進(jìn)一步的體內(nèi)試驗(yàn)及臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法: CCK8法檢測(cè)蟲(chóng)草素作用LLC、A549、H460在不同時(shí)間（24h、48h、72h）的細(xì)胞活力，以及蟲(chóng)草素聯(lián)合順鉑作用48h對(duì)三種細(xì)胞活力的影響；蟲(chóng)草素分別處理LLC、A549、H460細(xì)胞48h，通過(guò)流式細(xì)胞儀（f

3、low cytometry，F(xiàn)CM）檢測(cè)細(xì)胞周期的變化；蟲(chóng)草素分別作用三種細(xì)胞12h、24h、48h，利用流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，蛋白質(zhì)免疫印跡分析檢測(cè)增殖及凋亡相關(guān)蛋白ERK、P-ERK、AKT、P-AKT及caspase-3的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果: 經(jīng)蟲(chóng)草素處理后的LLC、A549、H460細(xì)胞活力受到明顯抑制，并且這種抑制作用呈現(xiàn)時(shí)間及濃度依賴性，相關(guān)系數(shù)r分別為0.882、0.997和0.891（P<0.01）；順鉑

4、與蟲(chóng)草素聯(lián)合作用組較順鉑組明顯降低腫瘤細(xì)胞的存活率（P<0.01）；流式細(xì)胞儀分析顯示蟲(chóng)草素阻滯LLC及H460細(xì)胞周期于G2/M期（P<0.05），明顯阻滯A549細(xì)胞周期于G2/M期（P<0.01）；蟲(chóng)草素具有誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞LLC、A549、H460凋亡作用，并且這種作用與時(shí)間相關(guān)，r分別為0.973、0.974、0.946（P<0.01）；蟲(chóng)草素抑制肺腺癌細(xì)胞P-ERK，P-AKT蛋白的表達(dá)，并使凋亡相關(guān)蛋白caspase-3表達(dá)