MicroRNA-18a對宮頸癌細胞的放射增敏作用及其機制初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究microRNA-18a在宮頸癌組織中的表達量與患者對放療敏感性的關系，體外檢測其對宮頸癌細胞放射敏感性的影響，并對其機制進行初步探討，為宮頸癌的治療提供新的靶點。
　　方法：根據(jù)48例宮頸癌患者對放療的敏感性，將其首次就診時所取癌組織分為放療敏感組和放療抵抗組，通過qRT-PCR檢測兩組樣本中miR-18a的表達差異。利用脂質(zhì)體lipofectamine2000將miR-18a模擬物（mimic）、抑制劑（inhibi

2、tor）及相應陰性對照（NC）轉(zhuǎn)染至Siha和Hela細胞，MTT法、Hoechst染色法分別檢測轉(zhuǎn)染前后細胞的增殖及凋亡情況；克隆形成實驗分析miR-18a對兩種宮頸癌細胞放療敏感性的影響；流式細胞術檢測放療后各組細胞的凋亡情況；Western Blot實驗檢測放療后ATM及其下游蛋白γ-H2AX的表達；免疫熒光實驗通過觀察γ-H2AX焦點形成情況來檢測各組DNA損傷修復能力。
　　結果：通過qRT-PCR檢測，對放療敏感的患者

3、癌組織中miR-18a的表達量高于對放療抵抗的患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。MiR-18a mimic/inhibitor的轉(zhuǎn)染效率在48 h達最高（P<0.05）。MTT、Hoechst結果提示miR-18a對Siha和Hela細胞的增殖、凋亡無明顯影響（P>0.05）?？寺⌒纬蓪嶒烇@示miR-18a對Siha和Hela細胞具有放射增敏作用（P<0.05）；流式細胞術結果顯示miR-18a可以增加放療后腫瘤細胞的凋亡，差異有

4、統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Western Blot結果顯示miR-18a可抑制ATM及其下游蛋白γ-H2AX的表達。免疫熒光實驗提示miR-18a抑制DNA損傷的修復。
　　結論：1、宮頸癌組織中miR-18a的表達量與患者對放療的敏感性呈正相關；2、MiR-18a對Siha和Hela細胞的增殖、凋亡無明顯影響；3、MiR-18a通過抑制ATM的表達、減少DNA損傷的修復、促進放療后細胞凋亡，從而對Siha和Hela細胞起放射增

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