MicroRNA-18a對(duì)宮頸癌細(xì)胞的放射增敏作用及其機(jī)制初探.pdf

1、目的：研究microRNA-18a在宮頸癌組織中的表達(dá)量與患者對(duì)放療敏感性的關(guān)系，體外檢測(cè)其對(duì)宮頸癌細(xì)胞放射敏感性的影響，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討，為宮頸癌的治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：根據(jù)48例宮頸癌患者對(duì)放療的敏感性，將其首次就診時(shí)所取癌組織分為放療敏感組和放療抵抗組，通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)兩組樣本中miR-18a的表達(dá)差異。利用脂質(zhì)體lipofectamine2000將miR-18a模擬物（mimic）、抑制劑（inhibi

2、tor）及相應(yīng)陰性對(duì)照（NC）轉(zhuǎn)染至Siha和Hela細(xì)胞，MTT法、Hoechst染色法分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的增殖及凋亡情況；克隆形成實(shí)驗(yàn)分析miR-18a對(duì)兩種宮頸癌細(xì)胞放療敏感性的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)放療后各組細(xì)胞的凋亡情況；Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)放療后ATM及其下游蛋白γ-H2AX的表達(dá)；免疫熒光實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察γ-H2AX焦點(diǎn)形成情況來(lái)檢測(cè)各組DNA損傷修復(fù)能力。
　　結(jié)果：通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)，對(duì)放療敏感的患者

3、癌組織中miR-18a的表達(dá)量高于對(duì)放療抵抗的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。MiR-18a mimic/inhibitor的轉(zhuǎn)染效率在48 h達(dá)最高（P<0.05）。MTT、Hoechst結(jié)果提示miR-18a對(duì)Siha和Hela細(xì)胞的增殖、凋亡無(wú)明顯影響（P>0.05）?？寺⌒纬蓪?shí)驗(yàn)顯示miR-18a對(duì)Siha和Hela細(xì)胞具有放射增敏作用（P<0.05）；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示miR-18a可以增加放療后腫瘤細(xì)胞的凋亡，差異有

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Western Blot結(jié)果顯示miR-18a可抑制ATM及其下游蛋白γ-H2AX的表達(dá)。免疫熒光實(shí)驗(yàn)提示miR-18a抑制DNA損傷的修復(fù)。
　　結(jié)論：1、宮頸癌組織中miR-18a的表達(dá)量與患者對(duì)放療的敏感性呈正相關(guān)；2、MiR-18a對(duì)Siha和Hela細(xì)胞的增殖、凋亡無(wú)明顯影響；3、MiR-18a通過(guò)抑制ATM的表達(dá)、減少DNA損傷的修復(fù)、促進(jìn)放療后細(xì)胞凋亡，從而對(duì)Siha和Hela細(xì)胞起放射增