c-Met小分子酪氨酸激酶抑制劑ARQ197對肺腺癌細胞放射增敏作用及其機制的實驗研究.pdf

1、目的：研究和探討c-Met小分子酪氨酸激酶抑制劑ARQ197是否對肺腺癌細胞有放射增敏作用，若具有放射增敏作用則進一步探討其放射增敏的可能機制，為ARQ197作為增敏劑應(yīng)用于肺癌放射治療提供實驗依據(jù)。
　　方法：采用人肺腺癌細胞系A(chǔ)549、H1299體外培養(yǎng)作為研究對象。首先用不同系列濃度的重組人肝細胞生長因子（HGF）和ARQ197分別處理肺腺癌細胞，應(yīng)用克隆形成試驗檢測細胞增殖情況，篩選出用于放射敏感性研究的HGF和ARQ19

2、7的合適濃度。隨后將肺腺癌細胞分為以下四組：對照組、HGF處理組、ARQ197處理組、HGF和ARQ197共同處理組，應(yīng)用細胞克隆形成試驗，繪制放射后細胞存活曲線，觀察不同組別之間放射敏感性的差異。而后用 HGF單獨或聯(lián)合應(yīng)用不同濃度的ARQ197分別處理肺腺癌細胞，應(yīng)用蛋白印記檢測 HGF單獨或聯(lián)合應(yīng)用不同濃度ARQ197對細胞c-Met及下游Akt和Erk1/2蛋白表達和活化的影響。最后將肺腺癌細胞分為：對照組、ARQ197處理組，

3、觀察兩組接受2Gy照射前和照射后6h、9h c-Met及下游Akt和Erk1/2蛋白表達和活化水平的變化。
　　結(jié)果：肺腺癌細胞的克隆形成率隨著 HGF濃度的增加呈進行性升高，而隨著ARQ197濃度的增加則進行性下降。放射后細胞存活曲線示對照組、HGF處理組、HGF和ARQ197共同處理組及ARQ197處理組的SF2值，A549細胞分別為48.28±2.16％、82±2.62%、41.53±1.71%和38.91±1.71%，H1

4、299細胞分別為58.41.±3.47%、85.23±6.07%、44.80±3.47%和43.30±2.96%。HGF、HGF和 ARQ197共同處理及ARQ197對A549肺腺癌細胞的放射增益比分別為0.79、1.11、1.19，對H1299肺腺癌細胞的放射增益比分別為0.85、1.20、1.27。
　　H1299細胞在HGF刺激后，p-cMet、p-Akt、p-Erk1/2高表達，同時應(yīng)用ARQ197，隨著 ARQ197濃度

5、的增加，p-cMet、p-Akt、p-Erk1/2蛋白的表達進行性下降。細胞接受2Gy照射后，p-cMet、p-Akt、p-Erk1/2高表達；同時應(yīng)用ARQ197，p-cMet、p-Akt、p-Erk1/2蛋白的表達顯著下降，總的c-Met、Akt和Erk1/2蛋白的表達水平無明顯變化。
　　結(jié)論：通過平板克隆形成分析法，我們可以得出 ARQ197對人肺腺癌細胞有一定的放射增敏作用。通過蛋白印記檢測，我們進一步得出 ARQ197