穩(wěn)心草黃酮類化合物對(duì)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子影響的研究.pdf

1、目的：研究穩(wěn)心草黃酮類化合物對(duì)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖和細(xì)胞表達(dá)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)水平的影響，初步探討其防治肺動(dòng)脈高壓的療效及作用機(jī)制，為中藥開(kāi)發(fā)提供基礎(chǔ)研究資料。 方法：1.穩(wěn)心草品種由藥學(xué)專家進(jìn)行植物基源鑒定，穩(wěn)心草黃酮類化合物委托甘肅中醫(yī)學(xué)院科研中心提取并鑒定。2.組織貼塊法培養(yǎng)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)用3～8代生長(zhǎng)良好的傳代細(xì)胞。倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，電鏡鑒定(超微結(jié)構(gòu)分析)。3.MTT比色法測(cè)

2、定細(xì)胞增殖；流式細(xì)胞儀測(cè)定各組細(xì)胞細(xì)胞周期；雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)液中bFGF水平。 結(jié)果：1.貼塊培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)電鏡鑒定為動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞：倒置相差顯微鏡觀察，證明細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好。2.穩(wěn)心草黃酮類化合物對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞群有上調(diào)細(xì)胞周期中G0/G1期細(xì)胞數(shù)目，下調(diào)G2/M期、S期細(xì)胞數(shù)目的作用。3.黃酮類化合物高、中劑量組細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞周期、細(xì)胞培養(yǎng)液中bFGF含量與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)