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文檔簡介
1、目的：基于α-鵝膏毒肽(α-amanitin)的作用機制和乙肝病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄特點，初步探討α-鵝膏毒肽對HepG2.2.15細胞的毒性及其對乙型肝炎病毒(HBV)復(fù)制的影響。 方法：采用MTT法檢測不同濃度α-鵝膏毒肽對體外培養(yǎng)的HepG2 2.2.15細胞株的毒性，然后在無毒濃度下用不同濃度Q-鵝膏毒肽或拉米夫定與HepG2 2.2.15細胞共培養(yǎng)6天，分別在第3天和第6天收集細胞培養(yǎng)上清液，采用時間分辨免疫熒光法(TRFIA)
2、測定上清HBsAg、HBeAg濃度；收獲細胞提取總RNA,行逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測細胞內(nèi)HasAg和HBcAg mRNA的表達。 結(jié)論：在本實驗條件下α-鵝膏毒肽在0.006μg/ml～0.8μg/ml濃度時對HepG2 2.2.15細胞的毒性較小，低毒濃度下α-鵝膏毒肽可抑制HepG2 2.2.15細胞HBeAg、HBsAg的分泌及HBsAg和HBcAg mRNA的表達。隨濃度的增加，抑制作用越明顯，說明α-鵝
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