一種變態(tài)反應(yīng)性炎癥哮喘小鼠模型的建立與評(píng)價(jià).pdf

1、目的:研究一種變態(tài)反應(yīng)性炎癥哮喘小鼠模型的建立方法，并評(píng)價(jià)其效果。
　　方法:(1)將20只清潔級(jí)雌性BALB/c小鼠隨機(jī)編號(hào)后分成兩組:支氣管哮喘模型組和空白對(duì)照組。(2)致敏:于實(shí)驗(yàn)第0、7、14天每只小鼠分別腹腔注射0.2 ml致敏液(1.0mg/ml的OVA0.1 ml與等體積液態(tài)氫氧化鋁佐劑混和),對(duì)照組用生理鹽水代替。(3)激發(fā):于第17-23天連續(xù)7天將小鼠置于密閉容器中,以0.8mg/ml OVA磷酸鹽緩沖鹽溶液2

2、0 ml霧化吸入,每天一次,每次30 min,。(4)激發(fā)后研究:在最后一次激發(fā)后48 h(第25天)處死小鼠,收集支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)進(jìn)行白細(xì)胞總數(shù)以及嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的計(jì)數(shù)和分類,收集支氣管肺泡灌洗液上清液和小鼠血清,測(cè)定IFN-γ和IL-4,肺泡灌洗液行甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞(mastocyte,MC),同時(shí)留取肺組織行HE染色,觀察

3、模型組和對(duì)照組肺組織的病理變化。
　　結(jié)果:模型組在激發(fā)過程中出現(xiàn)明顯頭面部瘙癢,呼吸加深加快,安靜少動(dòng),弓背,前肢縮抬等哮喘急性發(fā)作表現(xiàn)。支氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞分類明顯增多。BALF經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色后可見肥大細(xì)胞。血清及BALF中IFN-γ下降,IL-4增高。肺組織病理切片見小支氣管及伴行血管周圍有較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),可見大量嗜酸性粒細(xì)胞,杯狀細(xì)胞增生,平滑肌增厚,部分肺泡間隔融合形成肺氣腫。而對(duì)照組小鼠肺組織肺