多病程大鼠實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎的模型建立、病理研究及機(jī)制探討.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)共包括五個(gè)部分第一部分:多病程大鼠EAE動(dòng)物模型的建立;目的:建立大鼠多病程EAE的動(dòng)物模型,為MS的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).結(jié)論:以GPSCH為抗原、在Wistar大鼠中誘導(dǎo)EAE,首次建立了大鼠多病程EAE模型,病理改變以血管周圍炎性浸潤(rùn)及白質(zhì)脫髓鞘為主,并伴有軸索的損傷,它具有人類MS的許多發(fā)病特點(diǎn),其中多病程的發(fā)病形式和主要病理特點(diǎn)與MS極其相似,是理想的MS動(dòng)物模型.第二部分:多病程大鼠EAE的病理研究及機(jī)制探討;目的:進(jìn)一步

2、研究多病程EAE大鼠的病理表現(xiàn),并對(duì)發(fā)病機(jī)制進(jìn)行可能的探討.同時(shí)也研究了EAE發(fā)病輕微及高峰時(shí)期病理改變及BBB通透性的變化.結(jié)論:1緩解-復(fù)發(fā)型和慢性進(jìn)展型病灶內(nèi)有增生的星形膠質(zhì)細(xì)胞,存在新舊病灶并存的現(xiàn)象,提示為慢性病灶,急性型和良性型未見(jiàn)增生、聚集的星型膠質(zhì)細(xì)胞,符合各型的病理表現(xiàn).2表現(xiàn)正常的白質(zhì)區(qū)增生、肥大的星形膠質(zhì)細(xì)胞提示其參與發(fā)病.3 BBB的破壞貫穿整個(gè)發(fā)病過(guò)程,促進(jìn)了異常免疫反應(yīng)的發(fā)生.4隨病變進(jìn)展病變部位由脊髓向腦部

3、擴(kuò)展.第三部分:EAE發(fā)病初期BBB變化的研究;目的:探討發(fā)病初期BBB的變化,以及MMPs在BBB破壞中的作用.結(jié)論:1、EAE動(dòng)物出現(xiàn)臨床癥狀前CNS組織內(nèi)已經(jīng)有血液成份IgG的滲出,且EB熒光也彌散于組織內(nèi),提示BBB通透性的增高發(fā)生在EAE早期.2、BBB的破壞導(dǎo)致炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn),表明BBB在疾病的發(fā)生中起重要作用.3、MMP-2,-9具有降解血管基膜的作用,在發(fā)病初期表達(dá)升高,與BBB的開(kāi)放一致,提示它參與了BBB的破壞.第四

4、部分:不同病程EAE發(fā)病過(guò)程中MMP-9和MMP-2的變化;目的:研究MMP-2和MMP-9在多病程EAE不同類型間的變化,探討MMPs在MS發(fā)病過(guò)程中的作用機(jī)制.結(jié)論:1 MMP-2、MMP-9在不同類型EAE中的表達(dá)基本是一致的.2急性型MMP-2、MMP-9的表達(dá)廣泛位于血管內(nèi)皮細(xì)胞、腦膜細(xì)胞和侵入的炎細(xì)胞中,推測(cè)參與腦和脊髓組織早期廣泛損傷.3緩解-復(fù)發(fā)型和進(jìn)展型MMP-2、-9在新病灶中呈陽(yáng)性表達(dá),而在舊病灶中呈陰性表達(dá),進(jìn)展

5、型EAE中有更多的血管內(nèi)皮細(xì)胞呈陽(yáng)性表達(dá),支持其有更多的潛在的活動(dòng)性病灶的存在,結(jié)合病理推測(cè)可能參與溶解髓鞘和破壞軸索,髓鞘抗原的釋放可能與疾病的進(jìn)展相關(guān).4良性型只有部分神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞呈陽(yáng)性表達(dá),而血管內(nèi)皮細(xì)胞和腦膜中的表達(dá)均呈陰性表達(dá),說(shuō)明病灶為靜止性.5隱匿型MMP-2、-9的表達(dá)各有不同,與病理改變一致.第五部分:髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)抗原及抗體的測(cè)定及意義;目的:測(cè)定EAE大鼠血清中MB