野生橘與枳橙和早花檸檬體細(xì)胞雜交創(chuàng)造新型砧木.pdf

1、野生種往往具有常規(guī)栽培種少有的優(yōu)良特性，它們?cè)谠黾舆z傳多樣性、品種改良等方面都有重要的價(jià)值。然而，柑橘的多胚性、童期長(zhǎng)、雌/雄性器官敗育等特性給野生種的有效利用增加了難度。體細(xì)胞雜交技術(shù)能有效克服這些問題，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交，使親本的核或胞質(zhì)DNA發(fā)生重組，轉(zhuǎn)移近緣野生種的有利性狀，為柑橘的遺傳改良提供了有效的途徑。本研究旨在利用體細(xì)胞雜交技術(shù)，將柑橘的野生品種與枳橙(PoncitrustrifoliataRaf×Citrussinensis

2、Osb.)、早花檸檬(C。limon)進(jìn)行原生質(zhì)體對(duì)稱融合，實(shí)現(xiàn)野生種有利性狀的轉(zhuǎn)移，創(chuàng)造新型砧木。主要結(jié)果如下： 1.調(diào)控野生橘愈傷組織的生長(zhǎng)狀態(tài)，建立了利于原生質(zhì)體分離的胚性愈傷組織懸浮系。經(jīng)愈傷組織、葉肉原生質(zhì)體的分離、純化、融合及培養(yǎng)再生，獲得了兩個(gè)組合，即崇義野橘(C.reticulata)+枳橙、崇義野橘+早花檸檬的再生胚狀體和植株。其中，崇義野橘+枳橙再生胚狀體的時(shí)間較長(zhǎng)，但很快誘導(dǎo)生芽，崇義野橘+早花檸檬的胚狀體

3、生長(zhǎng)迅速，但難以誘導(dǎo)生芽。說明在相同培養(yǎng)條件下，不同組合間融合產(chǎn)物的再生存在較大差異。 2.組合崇義野橘+枳橙再生的4棵最大的芽均為二倍體，SSR分析表明其核DNA除了具有葉肉親本與愈傷親本共有的特征帶外，還出現(xiàn)了兩條兩親本都沒有的新帶。隨機(jī)挑選崇義野橘+早花檸檬再生產(chǎn)物中的四個(gè)胚狀體，經(jīng)流式細(xì)胞儀測(cè)定，其中兩個(gè)是四倍體，兩個(gè)是二倍體，SSR分析證實(shí)兩個(gè)四倍體同時(shí)具有雙親的核DNA特征帶，是異源四倍體，且其中一個(gè)出現(xiàn)了新帶，可能