甘藍(lán)型油菜與諸葛菜體細(xì)胞雜交研究.pdf

1、諸葛菜（Orychophragmus violaceus（L.）O.E schulz，2n=24）為十字花科蕓薹族諸葛菜屬植物，是一個含特高亞油酸（53.17％）、油酸（20.32％）、棕櫚酸（14.31％）、低亞麻酸（4.76％）和低芥酸（0.94％）的天然野生種質(zhì)，是一種優(yōu)良的油料、蔬菜和飼料作物新種源?，F(xiàn)已獲得甘藍(lán)型油菜（Brassica napus L.AACC,2n=38）和諸葛菜屬間有性雜交種，并研究了其細(xì)胞遺傳學(xué)行為。本研

2、究通過體細(xì)胞雜交獲得甘藍(lán)型油菜和諸葛菜原生質(zhì)體再生植株，通過細(xì)胞學(xué)觀察和GISH分析雜種的染色體組成，探索對稱融合植株不育和不對稱融合部分可育這一現(xiàn)象發(fā)生的原因，獲得如下主要結(jié)果： （1）對油菜原生質(zhì)體再生及融合條件的影響因素進(jìn)行了研究，在本實(shí)驗(yàn)室成功建立油菜與其近緣屬種的原生質(zhì)體融合體系。結(jié)果表明，材料的基因型及培養(yǎng)條件如外植體的生理狀態(tài)、培養(yǎng)基的成分、pH值、激素配比、原生質(zhì)體的密度（包括培養(yǎng)密度和融合親本原生質(zhì)體的密度）等

3、因素對原生質(zhì)體持續(xù)分離和植株的再生具有較大的影響。 （2）獲得甘藍(lán)型油菜華雙3號和諸葛菜的體細(xì)胞雜種，并對再生植株進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)觀察。獲得的雜種植株均為混倍體，染色體數(shù)主要集中在48—62之間?？煞譃閮煞N類型：一類（No.100）雌雄性全部敗育，無論用諸葛菜還是甘藍(lán)型油菜進(jìn)行回交均不能結(jié)實(shí)，植株矮小，表型偏向于甘藍(lán)型油菜；另一類（No.101）雄性敗育，但雌性部分可育，用甘藍(lán)型油菜回交獲得10個幼胚，通過胚挽救獲得組培

4、苗。同時還獲得諸葛菜自身融合植株，和諸葛菜原生質(zhì)體再生植株（經(jīng)IOA和UV處理），其株型、花色、結(jié)實(shí)率、染色體數(shù)目等都發(fā)生了較大變化，可用作育種的中間材料。 （3）用基因組原位雜交技術(shù)（GISH）對融合植株進(jìn)行了鑒定，在雜種植株中鑒定出不同數(shù)目的諸葛菜染色體，證明成功獲得體細(xì)胞雜種植株，來自于諸葛菜的染色體（21—24條）在減數(shù)分裂后期I能正常分離，少量細(xì)胞中觀察到落后染色體。來自于不同親本的染色體組在減數(shù)分裂中表現(xiàn)得極不同步。