兩種不同病理類型腎病患者尿蛋白誘導(dǎo)人近端腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及其分子信號機制.pdf

1、本實驗的主要目的在于：比較兩種不同病理類型腎病患者尿蛋白誘導(dǎo)人近端腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的作用及其分子信號機制，并探討兩類尿蛋白作用差異的可能原因。 研究內(nèi)容包括： 1.收集并提純MCD和FSGS患者24小時尿蛋白，利用SDS-PAGE膠初步比較兩種不同病理類型腎臟疾病患者尿中蛋白組分的差異。 2.比較兩種病理類型患者尿蛋白對人近端腎小管上皮細(xì)胞損傷、增值及轉(zhuǎn)分化的影響。 3.探討p38 MAPK和ERK1

2、／2信號通路在尿蛋白介導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化過程中的活化狀態(tài)及可能的作用。 4.利用蛋白質(zhì)組學(xué)比較MCD和FSGS患者尿蛋白成分，分析差異蛋白在兩種尿蛋白不同刺激效應(yīng)中的可能作用。 所有計量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，根據(jù)方差齊性檢驗結(jié)果，兩組問比較采用獨立樣本t檢驗。多組問均數(shù)的比較采用單因素方差分析。所有數(shù)據(jù)均用SPSS11.0統(tǒng)計軟件處理，在統(tǒng)計分析中p＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論: 根據(jù)研究

3、結(jié)果，我們得出以下結(jié)論： 1.FSGS與MCD患者尿蛋白組成有差別。MCD患者尿蛋白以白蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白為主，F(xiàn)SGS患者尿蛋白混合物中大分子量蛋白較MCD患者明顯增多，其中測得IgG濃度明顯高于MCD患者。雙向電泳分析共找出12個差異蛋白，包括纖維蛋白原、纖溶酶原、碳酸酐酶、補體及白蛋白片段等2.FSGS和MCD患者尿蛋白均可誘導(dǎo)人近端小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，但FSGS尿蛋白的作用更強，提示FSGS患者預(yù)后較差可能與此有關(guān)。

4、 3.ERK1／2及p38 MAPK通路均參與調(diào)節(jié)FSGS尿蛋白誘導(dǎo)的小管細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，而僅p38 MAPK參與調(diào)節(jié)MCD尿蛋白的刺激效應(yīng)。提示兩類患者尿蛋白的腎臟損傷機制存在差異。 4.人血清白蛋白并不刺激腎小管細(xì)胞上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，對p38和ERK的活性也無明顯影響，提示白蛋白可能不是蛋白尿致腎臟損傷的主要因素。 5.MCD和FSGS患者尿蛋白組成存在差異，且兩類尿蛋白與血清蛋白對腎小管上皮細(xì)胞的損傷作用有不同，這可能是