日本血吸蟲抗獨特型抗體NP30抗體檢測法在云南大山區(qū)流行現場應用的研究.pdf

1、血吸蟲病是一種嚴重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病，以病原學檢查為確診的依據。由于病原學檢查在輕度感染者和晚期病人中漏檢率很高，而且費時、費力難以現場大規(guī)模應用，所以尋找能夠準確、方便、適用于現場的大規(guī)模普查血吸蟲病的診斷方法一直是血防研究的熱點課題。 目前，免疫學診斷方法已經廣泛應用。最早使用的有皮試法(intracemaltest，IDT)，因其敏感性和特異性均較差，目前應用已不多。循環(huán)抗原(circulatingantige

2、n，CAg)檢測理論上有療效考核價值，但CAg在體內很快被清除或形成免疫復合物，有人認為不能作為恒定的檢測靶目標。經典的抗體檢測方法由于治愈后抗體在血清中長期存在，不能區(qū)分現癥感染和既往感染，難以考核治療效果。因此，有人提出一種治療后能消失較快的短程抗體用于療效考核，這引起了廣大學者的興趣。 管曉虹等建立了一株日本血吸蟲單克隆抗獨特型抗體，命名為NP30[4]。經鑒定抗體同型為IgM，是日本血吸蟲腸相關抗原(GAA)的內影像，具

3、有與循環(huán)抗原(CAg)相似的療效考核價值，可替代蟲源性抗原用于血吸蟲病免疫診斷。同時，NP30用于湖沼型流行區(qū)如湖南、湖北、江西、安徽等地，取得了良好的效果。由于日本血吸蟲不同地理株所引起的免疫應答可能不同，因此本研究探討了NP30抗體檢測法(間接法ELISA)用于云南大山區(qū)血吸蟲病流行現場的可行性。 研究方法1.選點選擇云南省大理白族自治州巍山縣鼠街鄉(xiāng)鼠街行政村的沿朱什河谷分布的鼠街、杜瑪、谷目底三個自然村(該地區(qū)為血吸蟲病重

4、度流行區(qū)，且已8年未曾進行血吸蟲病全民防治工作)。以檢測點全部503位0～70歲的村民作為調查對象，對其逐一進行血吸蟲病病史個案調查，填寫個案調查表；收集糞便標本；抽取靜脈血液標本，分離血清。 取非血吸蟲病流行區(qū)山東濱州門診病人血清100份。 2.病原學檢測對收集的糞便用Kato-Katz法(三片)和糞便孵化法(全糞孵化)分別進行檢測。 3.免疫學檢測采集的血清樣本分別用NP30抗體檢測法(間接ELISA法)和深

5、圳康百德公司試劑盒(間接SEA/ELISA法)進行檢測。 研究結果1.病原學檢查結果糞便孵化法檢查陽性率為32.41﹪(163/503)；Kato-Katz法(三片)檢查陽性率為23.45﹪(118/503)。其中，EPG＜10的占79.66﹪(94/118)，EPG為11～100的占17.80﹪(21/118)，EPG＞100的僅占2.54﹪(3/118)。Kato-Katz法與糞便孵化法的陽性符合率為58.28﹪(95/16

6、3)。 2.免疫學檢測結果NP30抗體檢測法(間接ELISA法)檢測糞孵陽性血吸蟲病人血清敏感性為87.73﹪(143/163)，特異性為96﹪(96/100)；糞孵陰性人群血清檢出率為44.71﹪(152/340)。NP30抗體檢測法檢測Kato-Katz陽性血吸蟲病人血清敏感性為84.75﹪(100/118)；Kato-Katz陰性人群血清檢出率為50.65﹪(195/385)。 深圳康百德公司試劑盒(SEA間接EL

7、ISA法)檢測糞孵陽性血吸蟲病人血清敏感性為85.28﹪(139/163)(表4)，特異性為94﹪(94/100)；糞孵陰性人群血清檢出率為74.41﹪(253/340)。深圳康百德公司試劑盒檢測Kato-Katz陽性血吸蟲病人血清敏感性為87.29﹪(103/118)；Kato-Katz陰性人群血清檢出率為75.07﹪(289/385)。 3.統(tǒng)計學分析經χ2檢驗：NP30抗體檢測法與SEA/ELISA之間敏感性和特異性均無顯

8、著性差異(P＞0.05)；糞孵或Kato-Katz陰性人群血清檢出率兩種方法之間存在顯著性差異(P＜0.01)；糞便孵化法與Kato-Katz法的檢測結果有顯著性差異(P＜0.01)。 結論1.NP30抗體檢測法與經典法具有相似的敏感性和特異性，可用于大山區(qū)血吸蟲病流行現場。 2.推測NP30抗體檢測法的療效考核價值優(yōu)于SEA/ELISA法，這是因為NP30檢測系統(tǒng)在血吸蟲病流行區(qū)糞檢陰性人群中抗體陽性率明顯低于經典SE