糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞裂隙膜蛋白的改變及雷帕霉素的干預(yù)作用.pdf

1、背景：糖尿病腎?。―iabetic nephropathy，DN）是慢性腎臟病（Chronic kidney disease，CKD）最常見(jiàn)的原因之一，隨著糖尿病發(fā)病率的增加，DN引起終末期腎衰的比例也在逐年增加。DN的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確。哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶分子(Mammalian target of rapamycin，mTOR)信號(hào)在糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。晚近的研究顯示 mTOR信號(hào)抑制劑雷帕霉素可能可以延緩糖尿

2、病腎病的進(jìn)展，但其對(duì)足細(xì)胞裂隙膜蛋白的作用尚不清楚。
　　目的：①了解早期糖尿病腎病中大鼠的腎臟結(jié)構(gòu)和功能改變與足細(xì)胞裂隙膜蛋白異常改變的關(guān)系。②了解雷帕霉素對(duì)DN大鼠的治療作用及其對(duì)足細(xì)胞裂隙膜蛋白的作用。
　　方法：雄性 Sprague-Dawley（SD）大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（N組，n=6），糖尿病腎病組（D組，n=6）、雷帕霉素治療組（R組，n=6）；模型成功12周后，R組大鼠用雷帕霉素按2mg/(kg?d)劑量連

3、續(xù)灌胃4周，N組和D組等劑量生理鹽水灌胃，4周后分別留取各組大鼠血清、尿液、腎組織，進(jìn)行血腎功能、尿蛋白和腎組織學(xué)檢測(cè)，western blot和免疫熒光染色法檢測(cè)腎臟內(nèi) podocin、nephrin和 desmin的表達(dá)，免疫組化法進(jìn)行足細(xì)胞計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，DN大鼠24小時(shí)尿蛋白排泄量顯著升高[（122.31±15.42）mg/24h vs（436.53±79.42）mg/24h，P＜0.01]，系膜基質(zhì)增

4、多[（69.50±2.27）％ vs（72.70±2.98）%，P<0.01]，腎小球體積增大[（5.21±1.13）×106μm3 vs（15.18±5.02）×106μm3，P<0.01]，足突寬度增加[（410.16±61.51）nm vs（843.84±281.00）nm，P<0.01]以及足細(xì)胞數(shù)量下降[（474.00±22.72）vs（350.33±21.96），P<0.01]；而雷帕霉素干預(yù)組大鼠較 DN大鼠尿蛋白排泄量顯

5、著降低[（436.53±79.42）mg vs（321.78±112.91）mg，P<0.05]，系膜基質(zhì)增多改善[（72.70±2.98）% vs（70.63±2.88）%，P<0.01]，腎小球肥大緩解[（15.18±5.02）×106μm3vs（12.89±4.23）×106μm3，P<0.01]，足突寬度較小[（843.84±281.00）nm vs（600.81±67.44）nm，P<0.01]以及足細(xì)胞數(shù)量增加。DN大鼠中腎